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- 2025年12月27日
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上海代轩生物
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孔
平板克隆形成实验
细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。一般细胞在体外增殖六代以上，其后代形成的细胞群体称为细胞集落或克隆。每个克隆由单一细胞而来，含有50个以上细胞，大小在0.3-1mm之间。通过克隆形成可检测各种理化因素对细胞克隆形成能力的影响。平板克隆形成试验可检测贴壁细胞细胞的克隆形成能力，软琼脂集落形成试验可检测非锚着依赖生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系等。
一、技术流程
1、调整细胞状态
2、制备单细胞混悬液；
3、按细胞浓度梯度把细胞均匀接种于细胞培养平板；
4、细胞培养2到3周；
5、观察克隆，Giemsa染色，计算克隆形成率；
二、结果分析
克隆形成率= 克隆数/接种细胞数×100%
细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。一般细胞在体外增殖六代以上，其后代形成的细胞群体称为细胞集落或克隆。每个克隆由单一细胞而来，含有50个以上细胞，大小在0.3-1mm之间。通过克隆形成可检测各种理化因素对细胞克隆形成能力的影响。平板克隆形成试验可检测贴壁细胞细胞的克隆形成能力，软琼脂集落形成试验可检测非锚着依赖生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系等。
一、技术流程
1、调整细胞状态
2、制备单细胞混悬液；
3、按细胞浓度梯度把细胞均匀接种于细胞培养平板；
4、细胞培养2到3周；
5、观察克隆，Giemsa染色，计算克隆形成率；
二、结果分析
克隆形成率= 克隆数/接种细胞数×100%
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