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- 2026年01月10日
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上海代轩生物科技有限公司
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细胞划痕实验
细胞划痕是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。其实验原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。细胞划痕在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程，是研究细胞迁移的体外试验方法中最简单的方法。
实验主要步骤：
1. 质粒转染细胞：
准备A549细胞，转染前一天按照70-80%密度铺在6cm培养皿中。16h后，按照转染试剂说明书转染细胞（8μg质粒，20μL lipofectamine 2000转染试剂） 。转染24h后，重新铺盘，密度为30-40%。
2. 划线；
待细胞完全贴壁后，用200μL tip轻轻划线，垂直90度，用力均匀，确保划线处无细胞。
3. 细胞培养及拍照；
每隔3天换一次新鲜培养基。连续几天倒置显微镜下100X下拍照，记录细胞的迁移情况，直到细胞填满划痕处。
4. 统计分析。
划线两侧间距为average gaps（AGs），使用Image-Pro Plus软件分析各组细胞的AGs。
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文献和实验材料： 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头（灭菌） 无血清培养基 PBS 准备： 所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内） 流程： 1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。 2、在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。 3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂直于背后的横线划痕，枪头
本来是自己一直在园子里找教程，结果能找到的有用的信息都是需要积分才能看，几乎找遍全园子，也没有一个系统的教程。于是，我决定自己写一个帖子帮助那些跟我一样没有积分，需要帮助的战友，因为经历了之前的焦躁、无奈、急切，太理解这种心情了。首先，你需要下载一个image j的软件，这个很好找，园子里也有，就不赘述了。下面开始正式使用1.打开软件 选择你要处理的图片2.增强对比 选择process enhance contrast3.选择Normalize 将 satura...改为0.34.平滑边缘
细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。特点： 1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。2. 非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。3. 与包括活
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