血液直接PCR扩增试剂盒批发

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血液直接PCR扩增试剂盒批发由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多血液直接PCR扩增试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：血液直接PCR扩增试剂盒批发
英文名：Blood Direct PCR Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：WE0120
  本试剂盒是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，本产品使用简便，无需事先提纯可直接用血液为模板扩增目的基因，可有效扩增高GC含量的模板和引物。

试剂盒组成：

 

组份	50μl×40次	50μl×200次
2×Blood Direct PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意事项：建议使用时添加≤10%的全血为模板，加上血液后用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	20μl反应体系
2×Blood Direct PCR Mix	25μl	10μl
Forward Primer，10μM	1μl	0.4μl
Reverse Primer，10μM	1μl	0.4μl
Template Blood	0.5-5μl	0.25-2μl
ddH2O	up to 50μl	up to 20μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	35-40个循环
退火	55-60℃	30 s
延伸	72℃	30-60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所含热启动酶的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

我公司的血液直接PCR扩增试剂盒批发，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
ARB13132 小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)含量检测 Mouse cholest erolester transfer protein,cetp ELISA KIT
吲哚美辛 HEDTA-Na3 53-86-1
BL0937 生物素化羊抗人IgM抗体
2′-脱氧胞苷盐*(代"酸") Eschka’s mixture 3992-42-5
ARB11420 人载脂蛋白A4(Apo A4)酶联免疫定量检测 Human apolipoprotein a4,apo-a4 ELISA KIT
ARB12532 大鼠特异性免疫球蛋白E(sIgE)ELISA代测服务 Rat specific immunoglobulin e,slge ELISA KIT
草酸** Aldehyde Dehydrogenase, potassiu*(代"m")-activated 127-95-7
BL0628 赖*酸-琼脂糖凝胶4B lysine Sepharose 4B
SJ0541 葡聚糖凝胶C-50
ARB14010 绵羊白介素2(IL-2)ELISA检测服务 Sheep interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
PY08-080  哥伦比亚琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于药品中梭菌的分离和鉴别
头孢曲松* 3,4-Dimethoxybenzoic acid 104376-79-6
CBZ-L-苏*酸 CHC 19728-63-3
D-组*酸 D-Phenylalanine 351-50-8
血液直接PCR扩增试剂盒批发关键词：WE0120,血液直接PCR扩增试剂盒,Blood Direct PCR Kit


·哺乳动物蛋白抽提试剂盒
编号：WE0262
英文名称：Mammalian Protein Extraction Kit
规格：25次|100次
  本试剂盒能够快速，温和，高效的裂解哺乳动物细胞，有效提取细胞浆和细胞核蛋白。该试剂使用温和配方保证所提取蛋白保持生物学活性并可应用于多种蛋白分析试验，如：报告基因和酶活性测定，免疫检测，蛋白纯化等。提取后蛋白可采用BCA法进行蛋白定量分析。哺乳动物蛋白抽提试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。

试剂盒组成：

组份	25次	100次
Mammalian Protein Extraction Reagent	25ml	100ml
Protease Inhibitor Cocktail	250μl	1ml

保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温

注意事项：
1、本产品可有效裂解细胞培养板培养的贴壁细胞(无需刮取)以及离心收集的悬浮细胞，较反复冻融或超声法具有更高提取效率。但对于组织蛋白的抽提，建议使用组织蛋白抽提试剂盒(WE0260)。
2、表1中所列的是贴壁细胞蛋白提取的最佳使用量，先收集细胞可以减少试剂用量从而获得更高的蛋白浓度。
3、也可以根据细胞数量估计抽提试剂的使用量。如2×106个Hela细胞约重20 mg，需要加入200μl抽提试剂。
4、通过本产品提取的蛋白，可通过BCA法进行蛋白定量分析。

使用方法：

贴壁细胞蛋白抽提
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Mammalian Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、小心倾去贴壁细胞的培养液，使用PBS漂洗细胞。
3、加入适量Mammalian Protein Extraction Reagent(抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，在冰上用枪头吹打贴壁细胞，将裂解液转移至离心管中，冰上孵育20分钟，让细胞充分裂解(试剂使用量请参考附表1，冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、14000×g离心5-10分钟。
5、转移上清液至新管中，用于进一步分析。

悬浮细胞蛋白提取
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Mammalian Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、将悬浮细胞2,500×g，离心10分钟，弃去上清。使用PBS漂洗细胞。2,500×g，离心10分钟，弃去上清。
3、加入适量Mammalian Protein Extraction Reagent，抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail，即1×工作液。
4、每100 mg细胞加入至少1ml 1×工作液。如提取的样本量较大，可首先使用少量1×工作液重悬细胞，然后加入剩余工作液。
5、吹打均匀后，冰上放置20分钟，让细胞充分裂解(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
6、14000×g离心15分钟。
7、转移上清至新管中，进行下一步分析。

附表1. 抽提试剂使用量推荐表

细胞培养板类型或平皿类型	抽提试剂使用量
100mm	500-1000μl
60mm	250-500μl
6孔培养板	200-400μl/孔
24孔培养板	100-200μl/孔
96孔培养板	50-100μl/孔

附表2. 常见问题及解决办法

问题	可能原因	解决方法
低提取率	低蛋白表达量	优化转染系统
	试剂使用量不够	增加抽提试剂使用量
	试剂无法溶解细胞膜	增加裂解时间或者加大晃动幅度
无法获得膜蛋白	更适合提取核浆蛋白	使用真核细胞膜蛋白抽提试剂盒

储存条件：-20℃


血液直接PCR扩增试剂盒批发关键词：WE0120,血液直接PCR扩增试剂盒,Blood Direct PCR Kit

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