- ￥1299
- 擎科生物
- TSE011
- 武汉
- 2026年04月21日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
T5 Direct PCR kit (Plant)
- 保质期：
-25~-15℃保存2年
- 供应商：
北京擎科生物科技股份有限公司
- 规格：
5×1.0 mL
本产品是一款专为叶片、种子等植物样品直接扩增设计的试剂盒，适用于2 kb以内DNA片段的扩增。植物样品经过简单的裂解处理即可作为PCR扩增模板，无需进行基因组DNA的提取，使用更加简便。产品中所含的T5 Plant DNA Polymerase，是在具有校正活性的高保真DNA聚合酶基础上改造而来，特殊的DNA-Binding结构Sso7d蛋白结构域的融合使其具有超快的延伸速度，同时基于lacZα法测试，该酶的保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍。产品中特别添加特异性增强因子SuperPrime及延伸增强因子Extension Ehancer，显著提高了扩增产量与特异性，优化的反应缓冲液可减少扩增条件探索，极大地节省时间。
本产品为2×浓度的PCR直扩预混液，已包含合适浓度的Mg2+、DNA聚合酶和dNTPs，使用时只需添加模板和引物，并补水至1×浓度即可进行反应。使用本试剂盒扩增的产物为平末端，纯化后可用于后续克隆（推荐T载体目录号:TSV-007B）、酶切、测序及文库构建等实验。
【产品特点】
无需提取基因组DNA，操作简便，省时省力；
改造的T5 Plant DNA Polymerase，具有极高的抑制物耐受度，保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍；
快速扩增，延伸速度高达10 s/kb；
适用于多种植物的叶片、种子等样品。
【产品应用】
适用于植物样品的直接扩增，可用于植物基因敲除分析、转基因检测等鉴定型实验，同时适用于对保真性要求较高的基因克隆等实验。
【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。
| 组分 | 规格 |
| 2×T5 Direct PCR kit（Plant） | 5×1.0 mL |
| Lysis Buffer A | 1×10 mL |
| Dilution Buffer B | 1×10 mL |
| Positive Control Primer Mix（RbcL）（10 μM each） | 100 μL |
【操作流程】
反应体系
| 50 µL 体系 | |
| 2×T5 Direct PCR kit（Plant） | 25 µL |
| 10 μM Primer F | 2 µL |
| 10 μM Primer R | 2 µL |
| Template DNA | 1~3 µL |
| ddH2O | Up to 50 µL |
反应程序
| 温度 | 时间 | 循环次数 | ||
| 1 | 预变性 | 98 ℃ | 3 min | 1 cycle |
| 2 | 变性 | 98 ℃ | 10 s | 30~40 cycles |
| 退火 | Tm+3 ℃ | 10 s | ||
| 延伸 | 72 ℃ | 10~30 s/kb | ||
| 3 | 终延伸 | 72 ℃ | 3~5 min | 1 cycle |
【实例分享】
两份水稻样品a，b用4对引物进行鉴定，产物大小分别为536 bp、980 bp、1800 bp、2300 bp。分别取2 mm水稻叶片使用Lysis Buffer A裂解后取1µL裂解液进行扩增。
【问题讨论】
Q1：直扩怎么取样？
A1：T5 Direct PCR kit（Plant）适用于植物叶片及种子、微生物等的直接PCR扩增，样品无需提取基因组DNA。样品推荐取样量如下：植物叶片、根茎≤2 mm。
植物种子≤2 mm（半粒绿豆大小）外壳比较坚硬的种子可进行研磨破碎
菌落：使用牙签或枪头轻轻粘取单个菌落（菌落痕量肉眼可见即可）菌液：≤10 µL
菌丝：使用牙签或枪头轻轻刮取适量新鲜菌丝，避免挑取培养基等其他杂菌物质蘑菇等大型真菌≤2 mm
本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
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文献和实验cycles 94-95°C for 30 sec 45-70°C for 10-30 sec 72°C for X min(1min/kb) Final extension 72°C for 5 min Final soak 4-10°C
°C for X min(1min/kb) Final extension 72°C for 7 min Final soak 4-10°C 6) For a simplified hot start, proceed as described in step 7. Otherwise, place the PCR tubes in the thermal cycler and start the cycling
of tissue/ cell harvest. Dynabeads® mRNA DIRECT™ Kit protocols can be scaled up or down to suit specific sample source and quantity. Please see section "Sample Guidelines and Scaling" before preparing the sample, and for recommended bead and buffer volumes
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