北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家

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北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持，本产品用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家
规格：20次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。

产品特点：
1.一次制备，-80℃保存，多次使用，免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae，也适用于其他多种实验用酵母菌株，包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒，也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母，最高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母，效率稍低，范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site－Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液)，其中A型只用于制备感受态细胞，B型还带高效转化液。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

产品组成：

 

成分	20T(A)	20T(B)
制备液A	120ml	120ml
制备液B	6ml	6ml
制备液C	10ml	10ml
转化液A	无	30ml
转化液B	无	30ml
说明书	1份	1份

自备试剂：YPD培养基

使用方法：

一：酵母化学感受态细胞的制备
说明：按本方法制备1 管酵母化学感受态细胞就需要OD600达到0.6-1.0的新鲜酵母培养液10mL，用户需根据所需酵母感受态细胞的数量决定培养细胞的体积。如果超过10mL，则制备液的使用量需要按比例增加。
1. 挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以)，接种到装在50mL离心管中的10mL的自备的YPD培养基中。
2. 30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟，直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1×107细胞/mL)。
3.室温3000rpm离心5 min，弃上清得酵母细胞沉淀。
4. 新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10mL 酵母需要5.25mL的工作液，其配制方法是：将4.75mL 制备液A、0.25mL 制备液B和0.25mL 制备液C 加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。
5. 用0.5倍体积的新鲜配制的酵母感受态制备工作液洗涤酵母细胞沉淀一次(对10mL 酵母则需要5mL 酵母感受态制备工作液)。即混合后振荡1分钟，室温3000rpm离心3分钟，去上清得洗涤后的酵母细胞沉淀。
6. 再用0.02倍体积的酵母感受态制备工作液充分重悬菌体(对10mL酵母，则需要0.2mL 酵母感受态制备工作液)。
7. 按每管0.2mL 分装到冷冻管中，放入保温冰盒中冷却半小时后再放入-80℃冰箱待用。0.2mL的感受态细胞足够1次转化使用。注意：放入保温冰盒的目的是使温度缓慢下降，急冻将使转化效率降低，这点跟大肠杆菌感受态制备过程不同。

二：化学转化酵母感受态细胞(只有B型提供相关试剂)
1. 将总体积不超过20μl的0.1-5μg质粒DNA 加到刚从-80℃冰箱取出的、还处于凝固状态的0.2mL 酵母感受态细胞上。注意：最好同时做一个不加质粒DNA的阴性对照组。
2.室温充分振荡直到凝固的感受态细胞完全融化。注意：此步非常关键，如果能在恒温振荡器上37℃振荡5分钟，则效果更好。
3. 加入1.4mL转化液A，轻柔颠倒混匀一分钟。
4. 30℃培养1小时。
5.室温3000g离心5秒，弃上清。
6.在酵母细胞沉淀中加1.0mL转化液B，振荡一分钟。
7.室温3000g离心5秒，弃上清。
8.在酵母沉淀细胞中加入适量(如100μl)的转化液B，混匀后在在选择培养基上全部涂盘。
9. 30℃培养3-5 天后即得酵母转化菌落。

关于北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
NF-233 羊抗猫IgG血清
PY02-072A  V-P半固体琼脂  250克  
003002 狗血浆 100ml|500ml
ARB11831 人潜伏膜蛋白1(LMP-1)酶免分析 Human latent membrane protein-1,lmp-1 ELISA KIT
马尿酰-组*酰-亮*酸 Choline oxidase 207386-83-2
甲*(代"酚")红*盐 Maltodextrin 62625-29-0
ARB11249 人胃动素(MTL)酶免分析 Human motilin,mtl ELISA KIT
ARB10857 人抗染色体抗体(Anti-chromosome Ab)Elisa方法检测 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,ahcgab ELISA KIT
BTN131143 AMPPD AMPPD
ARB12588 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)代做ELISA实验 Rat matrix metalloproteinase 3,mmp-3 ELISA KIT
BL0866 羊抗人纤维蛋白原免疫血清
56-75-7 ChloramphenicoL   *霉素
CYB162011 兔抗小鼠IgG(抗血清) 0.5ml
F030633 FITC标记山羊抗人IgG(H+L)抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*FITC
ARB13120 小鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)免费代测 Mouse leptospira igg,lep igG ELISA KIT
ARB11297 人钩端螺旋体IgM(LeptospIrA IgM)酶免分析 Human leptospira igM ELISA KIT
ARB10821 人抗麦胶蛋白(AGA)Elisa方法检测 Human anti-gliadin antibody,aga ELISA KIT
马来酰肼*盐 Nickel oxalate dihydrate 689-82-7
SJ0409 MUG4 甲基伞形酮葡萄糖苷酸
PY01-109  五号胆盐  25克  
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·增强型DAB显色试剂盒
编号：BTN81223
英文名称：Enhanced DAB Chromogenic Kit
规格：100mL
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂，适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物，可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量，进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下：


产品特点：
1．即开即用，不需要用户准备任何材料。
2．DAB以干粉提供，方便运输。
3．可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4．跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5．显色过程中需要避光，在显色后可拍照或扫描。

试剂盒组成：

成分	规格
DAB干粉	100mg
10mL棕色塑料瓶	1个
DAB溶解液	100ml
增强剂	1ml
H2O2	1ml
说明书	1份

 注意：本产品可以配制100mL增强型DAB显色液，但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期1年

自备试剂：超纯水、HRP标记物(抗体或探针)处理过的印迹膜。

使用方法：
1．从DAB溶解液中取5mL到一个10mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供)，将100mg DAB干粉全部加入，充分振荡混匀，所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完，可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2．按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量，并按下表配制DAB显色液(此处以配制10mL为例，用户如需要配制其他体积，可按比例增减各成分用量)：

成分	用量
DAB溶解液	9.4ml
20×DAB浓缩液	0.5ml
增强剂	0.1ml
H2O2	10μl

 注意：此溶液必须立即使用。
3．如果是印迹膜，则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中，室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟，最长不超过10分钟，具体跟靶分子浓度密切相关)，迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分，照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4．如果是组织切片，则直接将DAB染色液滴加在切片上，室温避光放置10分钟，然后浸在超纯水中数次，空气中干燥后显微镜下检测或照相。


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PY04-084  多粘菌素B  0.5mg/支×10支  每支添加于15ml胰酪胨大豆多粘菌素肉汤培养基基础中，用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定
ARB10528 人他克莫司(FK506)含量测试 Human tacrolimus-fk506 ELISA KIT
BL1340 PH计电极保存液
ARB13031 小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA代测服务 Mouse immunoglobulin m,IgM ELISA KIT
乙酰水杨酸 G-1-P-Na2 50-78-2
ARB10600 人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)酶免分析 Human platelet basic protein,pbp ELISA KIT
四氮唑蓝 CBZ-L-Pyroglutamic acid 1871-22-3
F030638 FITC标记山羊人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
BL1377 20×SSC PH5.3
F030238 HRP标记山羊人IgM抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC
聚*乙*(代"烯")树脂 β-Alanine
BL1299 pET-32a(+)
50-69-1 D-核糖 D-Ribose

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