多点突变试剂盒现货供应

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百奥莱博专业生产供应多点突变试剂盒现货供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：多点突变试剂盒现货供应
英文名：Multipoints Mutagenesis Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：BTN130823
规格：20次
本试剂盒是利用一对设计特殊的锚定引物及几条定点突变引物对DNA多个不同位点同时进行定点突变的试剂盒。锚定引物“尾巴”上的特异性序列是与大多数基因都不相匹配的，因此保证了PCR扩增的特异性。本试剂盒的主要原理是：设计合成同一方向的锚定引物及定点突变引物，将锚定引物及定点突变引物用T4聚核苷酸激酶磷酸化后与模板质粒DNA进行退火，再使用T4 DNA聚合酶和T4 DNA连接酶进行延伸和连接形成突变单链，然后使用锚定引物“尾巴”上的特异性引物(ETail F/ETail R)和高保真DNA聚合酶对突变单链进行PCR扩增，再将获得的双链PCR产物克隆回原载体中，即可达到实验目的，获得目的突变体。原理如下图：


本试剂盒操作快速简单，只需一天时间便可以完成整个突变操作。本试剂盒尤其适用于插入片段长度在1.0 kb以下的多位点基因突变实验，对于1.0 kb以上的DNA片段的多位点基因突变，由于引物退火的不完全、PCR扩增中可能引入新的突变点等原因，可能降低实验成功率。本公司曾经使用本试剂盒，成功进行了1.5kb DNA片段的多位点基因突变实验。本试剂盒中的Anchor F1和Anchor R1引物可供克隆于pUC系列载体或pBluescript系列载体中的DNA片段的多位点基因突变实验，使用方便。使用试剂盒中的Control质粒及各种Control实验用引物可进行Control实验。

成份	规格
T4 Polynucleotide Kinase(10U/μl)	40μl
10×Reaction Buffer*1	40μl
ATP(10mM)	48μl
10×Annealing Buffer	40μl
10×Extension Buffer	60μl
T4 DNA Ligase(60U/μl)	20μl
T4 DNA Polymerase(1U/μl)	20μl
PrimeSTAR HS DNA Polymerase(2.5U/μl)	10μl
5×PrimeSTAR Buffer(Mg2+plus)	200μl
dNTP Mixture(2.5mM each)	80μl
Control Plasmid(50fmol/μl)	20μl
Control Primer Mix(12.5pmol/μl each)	20μl
Control Anchor F(8pmol/μl)	5μl
Anchor F1(8pmol/μl)*2	20μl
Anchor R1(8pmol/μl)*2	25μl
ETail F(10pmol/μl)	25μl
ETail R(10pmol/μl)	25μl
Ligation Solution I	100μl
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

我公司的多点突变试剂盒现货供应，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·膦酰二肽溶液(10mg/mL)
编号：BTN130545
英文名称：Phosphoramidon Solution
规格：10mL
本品为10mg/mL的膦酰二肽水溶液，工作浓度为4-330μg/mL。膦酰二肽(N-(α-鼠李吡喃糖基膦酰胺)-L-亮*酸-L-色*酸)，分子量是579.6，可溶于水，是一种来自微生物的蛋白酶抑制剂。可以特异性抑制*嗜热蛋白酶、胶原酶和微生物来源的金属内切蛋白酶。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期三个月。


·ATP溶液(100mM)
编号：BTN120625
英文名称：ATP Solution，100mM
规格：0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于体外RNA转录合成。

ATP分子式为C10H13N5O13P3Na3，分子量是573.1，消光系数为15.4×103 M-1×cm-1(pH7.0)，λmax为259nm。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·荧光素(FITC)标记亲和素
编号：BTN131088
英文名称：FITC-Avidin
规格：5mg
本产品为荧光基团标记的亲和素。激发波长/发射波490nm/520nm，无游离荧光素。应用于荧光激活细胞分选和组织化学染色等领域。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·Tris饱和酚
编号：BTN3191
英文名称：Tris-Saturated Phenol
规格：100mL
本产品是将重蒸酚用Tris-HCl(pH8.0)缓冲液充分饱和而得，pH在8左右，不会再吸收样品中的水分。它可用于DNA提取时去除蛋白质。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

疑难解答：
Q：提取DNA时一定要用Tris饱和酚吗？
A：不一定，最重要的是pH，Tris(其实是Tris-HCl)只是pH缓冲液，用其饱和酚的目的是提高酚的pH。如果用其他缓冲液使酚的pH升高到7以上，也可以用于DNA纯化。如果低于此pH，DNA可能会进入酚相而丢失。

·Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒
编号：BTN131083
英文名称：Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
规格：20次
血液样品和各种临床样品(包括组织检查、FFPE切片或少量细胞样品)都是基因表达分析和诊断的常见材料，但这些样品通常数量有限，质量不高，还没法进行第二次取样。所以得到足够RNA量供后续试验是一个非常棘手的瓶颈。为解决这一问题，本公司根据Ribo-SPIA技术，开发了本产品。Ribo-SPIA技术的核心是利用DNA/RNA嵌合引物，以带polyA尾巴的mRNA为模板进行逆转录并得到双链cDNA、RNase H不间断地在cDNA第1链中的RNA部分产生裂口，DNA聚合酶以此裂口为基础进行链取代聚合反应，产生cDNA单链。

产品特点：
1.高效，能线性扩增1000-10000倍，能用5-100 ng总RNA模板扩增得到5μg左右的单链cDNA(扩增的cDNA主要来源于总RNA中的mRNA)。
2. 步骤简单方便，扩增在恒温进行，只需要4个小时，不需要特殊仪器设备。
3. 保真性好，保持RNA样品中各分子的相对丰度。
4. 尤其适用于RNA产量和质量都不高的样品。
5.扩增得到的单链cDNA能直接用于各种后续试验，包括qPCR、芯片分析、杂交反应等。
6. 本产品足够做10次双链cDNA的合成，20次SPIA扩增。

试剂盒组成：

成分	规格
cDNA一链合成缓冲液	40μl
MMLV逆转录酶	10μl
cDNA二链合成缓冲液，5×	160μl
cDNA二链合成酶混合液20×	40μl
SPIA RT引物	40μl
SPIA反应液，5×	320μl
SPIA扩增引物	320μl
SPIA酶混合液	120μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为1年。

使用方法：

一：样品RNA的制备
本产品不含RNA相关试剂，用于Ribo-SPIA扩增的每个批次的RNA样品最好先做一个预实验。总RNA样品的浓度必须在1-20ng/μL，一次RIBO-SPIA所需总RNA的量为1ug。也可以使用mRNA，一次Ribo-SPIA所需总mRNA的量为5-100 ng。过低则需要浓缩，过高则需要用无RNase的水稀释。RNA必须经过DNase处理，不能含DNA污染。微量提取时不能使用核酸类的助沉剂。注意：本产品只能扩增含带polyA尾巴的RNA，不能扩增DNA和不含polyA尾巴的RNA。

二：一管式双链cDNA的合成
1.在0.5mL PCR管中，按下表配制双链cDNA合成反应。
注意：最好每次实验设置一个阴性对照组，在此对照中用超纯水替代自备的mRNA或总RNA:

成分	用量
自备mRNA或总RNA	4μL mRNA(5-100ng)或4μL总RNA(1ug)
SPIA RT引物MTA3 20uM	1μl
65℃，5分钟后室温放置2分钟，短暂离心后放4℃
cDNA一链合成缓冲液	4μl
MMLV逆转录酶	1μl
轻柔吹打混匀后得到10μL的反应体系。42℃保温90分钟合成第一链cDNA。结束后70℃保温15分使酶变性，最后4℃放置，然后加入下列成分，得到80μL反应体系。
超纯水	50μl
cDNA二链合成缓冲液	16μl
cDNA二链合成酶混合液	4μl
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时合成cDNA第二链，然后75℃ 15分灭活酶，最后4℃放置待用

三：SPIA扩增
2.在0.5mL PCR管中，按下表配制20μL的SPIA反应体系。注意：最好设置两个阴性对照组，在此两个对照中分别用超纯水替代SPIA引物和cDNA双链反应液。

成分	用量
cDNA双链反应产物	40μL(来于上步)
SPIA扩增引物10uM	16μl
SPIA反应液，5×	16μl
超纯水	42μl
94℃20秒后50℃放置复性待用
SPIA酶混合液	6μl
轻柔吹打混匀后得到120μL反应体系，50℃扩增60分钟，最后4℃放置

四：SPIA扩增产物的检测
3. 取5μL SPIA扩增产物进行PAGE电泳检测。标准的反应结果是产生长度在200-2000bp之间的产物。
4. 如果产物将用于PCR定量，则可以不经过纯化直接使用，如果需要用于芯片杂交和浓度测定，则需要按常规的方法纯化cDNA以便去除残留的dNTP和引物。
5. OD检测纯度和浓度。在OD260的波长下测样品你给的光吸收。由于扩增产物是单链DNA，故1OD260=33ug/mL。
6. 所得DNA可以放-20℃长期放置。


多点突变试剂盒现货供应关键词：Multipoints Mutagenesis Kit,BTN130823,多点突变试剂盒

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