北京现货T4 DNA连接酶打折促销

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名称：北京现货T4 DNA连接酶打折促销
规格：40000U|200000U
产地：国产|进口
编号：YT029
本酶可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。

用途：T4 DNA Ligase常用于DNA片段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源：本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit，以Weiss unit计，本产品共200单位。
纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规连接反应要求。
酶储存溶液：20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10×Ligation Buffer：400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制：65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活；NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。


T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果如上图，本品的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜；B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。

注意事项：
1. 对于普通的转化大肠杆菌的操作，不必对连接产物进行纯化，连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时，通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚*仿抽提方法等纯化DNA，然后再进行电转。
2. 需进行平端连接或快速连接时，推荐使用百奥莱博的快速DNA连接试剂盒(YT028/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接，但效率较低。
3. 普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察，推荐先在65℃孵育10分钟使T4 DNA Ligase失活，以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。

储存条件：-20℃。

关于北京现货T4 DNA连接酶打折促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)
编号：YT394
英文名称：M-MLV reverse transcriptase II (RNase H-)
规格：2000U|10KU|50KU
本品是一种经过改造和优化的M-MLV反转录酶，具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能够以RNA或DNA为模板，在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成，即可以进行cDNA(complementary DNA)的第一链合成。

本产品是最常用的反转录酶之一，广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成，后续可以用于PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。本品还可以通过反转录用于DNA探针的荧光、生物素、地高*(代"辛")或同位素标记等，也可以通过引物延伸(primer extention)来分析和研究RNA。

本产品无RNase H活性，反转录效率高、产物长度长。本产品与野生型M-MLV反转录酶相比，无RNase H活性，不能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA，从而有助于高效合成长度更长的cDNA。本产品经测试可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1)，反转录的最大长度可以超过10kb。


使用本品反转录总RNA后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。

本产品热稳定性高。最适反应温度为42-45℃，但当温度达到50℃时仍具有很高活性，且可获得较高产量的cDNA。


在不同温度下的反转录效果。用从NIH3T3细胞抽提获得的总RNA 500 ng，在20μl的反转录体系中按照图中所示温度进行反转录。反转录完成后取1μl反转录产品进行目的基因的PCR扩增和电泳。

本品是一种大肠杆菌重组高表达的的反转录酶，由于其表达量非常高，大大提高了本产品的性价比。本反转录酶含有从Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase基因克隆的缺失RNase H domain的pol基因，并进行了突变优化以提高其热稳定性、反转录效率和表达量。

酶活性定义：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10 min at 37℃ using poly(A)·oligo(dT) 12-18 as template-primer。反应体系为 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。

酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% NP-40 and 50% glycerol。

失活或抑制：80℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚*(polyamine)对M-MLV反转录酶(RNase H-)有抑制作用。

本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl，用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。

储存条件：-20℃。


北京现货T4 DNA连接酶打折促销关键词：T4 DNA Ligase,YT029,T4 DNA连接酶


·二甲基Histone H3(Lys4位点)抗体
编号：YT800
英文名称：anti-Di-Methyl-Histone H3(Lys4) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的histone H3*基端的含有双甲基化Lys4的一段多肽经过适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Di-Methyl-Histone H3(Lys4)抗体识别的是总Di-Methyl-Histone H3(Lys4)，可以检测内源性的Lys4双甲基化的histone
H3，未发现和Lys4非甲基化的histone H3、Lys4单甲基化的histone H3或Lys4三甲基化的histone H3有交叉反应。另外，本抗体与Lys9，Lys27，Lys36二甲基化或三甲基化的histone H3或Lys20二甲基化或三甲基化的histone H4都没有交叉反应。

组蛋白histone H2A，H2B，H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体相结合的DNA构成了染色质的基本结构核小体(necliosome)。组蛋白的存在确保了基因组DNA可以被相对致密而有序地堆放在细胞核中。人一个细胞的基因组DNA完全拉成线性的总长度约为1.4米，但染色质的总长度仅为9厘米，而有丝分裂时染色体的总长度仅为0.12毫米。除了核心组蛋白(core histone)histone H2A，H2B，H3和H4外，还有一类linker histone H1和H5。Histone H1可以结合核小体和DNA在核小体中进出的位点，从而使DNA的位置被锁定，有利于在核小体基础上形成更高级的空间结构(参考下图)。组蛋白结合区域的DNA长度为147bp，核小体间的DNA长度大约为50bp。染色质空间结构的松散还是致密很大程度上决定了该区域基因转录水平的高低(参考下图)。



组蛋白是真核生物中呈强碱性的蛋白。组蛋白可以被乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化修饰。这些修饰会改变染色质的空间结构，从而在基因转录调控、染色体装配等过程中起重要作用。通常，histone H2B的Lys5，Lys12和Lys15会发生乙酰化修饰。Histone H3的Lys9，Lys14，Lys18和Lys23会发生乙酰化修饰。Histone H3的Ser10，Ser28和Thr11都会发生磷酸化修饰。Histone H3的这些磷酸化和有丝分裂或减数分裂过程中的染色质浓缩密切相关。Histone H3 Thr3的磷酸化在很多物种中都非常保守，可以被激酶haspin所催化。Histone H3的Thr3磷酸化发生在有丝分裂早期(prophase)，在有丝分裂的晚期(anaphase)则被去磷酸化。Histone H3和H4是甲基化修饰的主要组蛋白，哺乳动物细胞中histone H3和H4是高度甲基化的。组蛋白可以被单、双或三甲基化(mono-,di-,and tri-methylated)，和基因转录调控和染色体装配密切相关。Histone H3的Lys4二或三甲基化和很多基因的转录激活相关。Histone H3的Lys4二甲基化和三甲基化和基因的转录激活密切相关。尽管Lys4二甲基化的histone H3也在非转录激活区被检测到，Lys4二甲基化和三甲基化的histone H3在异染色质中是检测不到的。Histone H3的Lys9单甲基化和二甲基化和基因沉默和异染色质装配有关，而Lys9三甲基化的Histone H3在异染色质的pericentric domain区域富集。

Histone H3在其*基端有一个较长的N terminal tail，在核小体的装配过程中起关键作用。Histone H3是各种histone中修饰程度最高的，在表观遗传(epigenetics)中起重要作用。Histone H3包括H3A1、H3A2和H3A3。人的hitone H3由近15个基因分别单独编码。

产品组份：
Di-Methyl-Histone H3(Lys4)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人histone H3*基端aa 1-20该段多肽
宿主：兔
用途：WB,IF,IHC,IP,ChIP
交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
Di-Methyl-Histone H3分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF(1:800),IHC(1:800),IP(1:25),ChIP(1:25)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


北京现货T4 DNA连接酶打折促销关键词：T4 DNA Ligase,YT029,T4 DNA连接酶

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