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多点突变试剂盒
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一年
Multipoints Mutagenesis Kit
大量
上海沪震实业有限公司
20 次盒
多点突变试剂盒产品及特点:
本试剂盒是利用一对设计特殊的锚定引物(Anchor Primer)及几条定点突变引物对DNA多个不同位点同时进行定点突变的试剂盒。锚定引物“尾巴”上的特异性序列是与大多数基因都不相匹配的,因此保证了PCR扩增的特异性。本试剂盒的主要原理是:设计合成同一方向的锚定引物及定点突变引物,将锚定引物及定点突变引物用T4聚核苷酸激酶磷酸化后与模板质粒DNA进行退火,再使用T4 DNA聚合酶和T4 DNA连接酶进行延伸和连接形成突变单链,然后使用锚定引物“尾巴”上的特异性引物(ETail F/ETail R)和高保真DNA聚合酶对突变单链进行PCR扩增,再将获得的双链PCR产物克隆回原载体中,即可达到实验目的,获得目的突变体。原理如下图:
本试剂盒操作快速简单,只需一天时间便可以完成整个突变操作。本试剂盒尤其适用于插入片段长度在1.0 kb以下的多位点基因突变实验,对于1.0 kb以上的DN**段的多位点基因突变,由于引物退火的不完全、PCR扩增中可能引入新的突变点等原因,可能降低实验成功率。本公司曾经使用本试剂盒,成功进行了1.5kb DN**段的多位点基因突变实验。本试剂盒中的Anchor F1和Anchor R1引物可供克隆于pUC系列载体或pBluescript系列载体中的DN**段的多位点基因突变实验,使用方便。使用试剂盒中的Control质粒及各种Control实验用引物可进行Control实验。
多点突变试剂盒使用及效果
详细使用步骤请参见使用手册。
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