常态细胞转化液(免感受态细胞制备)报价

常态细胞转化液(免感受态细胞制备)报价

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  • ¥200 - 1870
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN51101-RPS
  • 2025年07月12日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • 保存条件

      低温运输

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Tranzol

    • 库存

      768

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应常态细胞转化液(免感受态细胞制备)报价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
    英文名:Tranzol
    编号:BTN51101
    规格:20次
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验,使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备,保存和运输等繁琐的事情而操心,大大地缩短了基因克隆实验的时间,提高使用者的工作效率。

    产品特点:
    1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
    2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
    3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1,B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM,pET和Clion系列等。
    4.转化效率适中,使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
    5. 单管快速操作,整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行,最短可以在三十分钟内完成,不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
    6. 稳定性好,本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。


    成分 规格
    常态转化液 1ml
    阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL 5T
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB),每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
    2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中,用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液,则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
    3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时,可以提高转化效率一倍,但过长则转化效率又开始降低)。
    4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基),离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
    5. 短暂离心,用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出,否则残留培养基将会严重影响转化效率,故此步不能省略。
    6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
    7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀;在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体,也可以使用常用的pGEM,pUC,pBR322等质粒);在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照,如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
    8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时),然后冰浴放置5-10分钟。
    9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液,混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
    10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上,剩余溶液最好留4℃待用。
    11. 37℃ 16-24小时培养,阴性对照盘上不应有任何落菌,否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素,100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。

    使用效果:
    常态转化液使用效果
    左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。
    关键词:BTN51101,Tranzol,免感受态细胞制备,常态细胞转化液(免感受态细胞制备)


    更多有关常态细胞转化液(免感受态细胞制备)报价的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:

     

    编号 名称
    BTN131034 人基因组DNA混合液
    BTN120628 GTP溶液(100mM)
    BTN120514 即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS)
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    BTN100908A 一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)
    BTN120420 核酸外切酶III
    BTN131293 对*醌固定液
    BTN130657 热稳定无机焦磷酸酶(PPase)
    BTN101118 水样病毒沉淀剂
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    BTN130943 Southern级真菌DNA提取试剂盒
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    BTN120506 T4聚核苷酸激酶
    BTN90705 柱式土壤RNA提取试剂盒
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    BTN51207 Pfu DNA聚合酶
    BTN3091 液相RNase清除剂
    BTN100408 8M盐*(代"酸")胍溶液
    BTN70908 PAGE胶DNA回收试剂盒
    BTN60306 柱式血液DNA提取试剂盒
    BTN160905 动物RNA提取试剂盒(柱式提取)(无需*仿)
    BTN140430 大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞
    BTN130628 λ核酸外切酶
    BTN120406 柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒
    BTN131009 NP40裂解液
    BTN3674 一管式病毒DNA提取试剂盒
    BTN90503 电泳级甘油


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