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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Tranzol
- 库存:
768
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应常态细胞转化液(免感受态细胞制备)报价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
英文名:Tranzol
编号:BTN51101
规格:20次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验,使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备,保存和运输等繁琐的事情而操心,大大地缩短了基因克隆实验的时间,提高使用者的工作效率。
产品特点:
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1,B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM,pET和Clion系列等。
4.转化效率适中,使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作,整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行,最短可以在三十分钟内完成,不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好,本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
| 成分 | 规格 |
| 常态转化液 | 1ml |
| 阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL | 5T |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB),每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中,用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液,则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时,可以提高转化效率一倍,但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基),离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心,用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出,否则残留培养基将会严重影响转化效率,故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀;在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体,也可以使用常用的pGEM,pUC,pBR322等质粒);在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照,如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时),然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液,混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上,剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养,阴性对照盘上不应有任何落菌,否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素,100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。
使用效果:
左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。
关键词:BTN51101,Tranzol,免感受态细胞制备,常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
更多有关常态细胞转化液(免感受态细胞制备)报价的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
| 编号 | 名称 |
| BTN131034 | 人基因组DNA混合液 |
| BTN120628 | GTP溶液(100mM) |
| BTN120514 | 即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS) |
| BTN100836 | 亮抑蛋白酶胎溶液(10mg/mL) |
| BTN140651 | 12mL亲和层析柱 |
| BTN130930 | 百万碱基级血液DNA提取试剂盒 |
| BTN131093 | 荧光素标记的生物素 |
| BTN3130A | 三合一RNA上样液(A型,6X) |
| BTN90604A | PCR法DNA探针标记试剂盒 |
| BTN130659 | 三磷酸腺苷双磷酸酶 |
| BTN100912A | 长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉) |
| BTN170103 | Schiff试剂(雪夫试剂)(希夫试剂) |
| BTN130841 | 石蜡油,PCR级 |
| BTN130662 | Tth RecA蛋白 |
| BTN130969 | 冷冻型血液RNA保存液 |
| BTN131017 | 乙酰化牛血清白蛋白 |
| BTN110809 | 6mL亲和层析柱 |
| BTN80802A | 非冻型拭子DNA保存液 |
| BTN100908A | 一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD) |
| BTN120420 | 核酸外切酶III |
| BTN131293 | 对*醌固定液 |
| BTN130657 | 热稳定无机焦磷酸酶(PPase) |
| BTN101118 | 水样病毒沉淀剂 |
| BTN130886 | 植物线粒体总蛋白提取试剂盒 |
| BTN130943 | Southern级真菌DNA提取试剂盒 |
| BTN81212A | 一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH) |
| BTN120506 | T4聚核苷酸激酶 |
| BTN90705 | 柱式土壤RNA提取试剂盒 |
| BTN90801A | 一站式TA克隆试剂盒 |
| BTN51207 | Pfu DNA聚合酶 |
| BTN3091 | 液相RNase清除剂 |
| BTN100408 | 8M盐*(代"酸")胍溶液 |
| BTN70908 | PAGE胶DNA回收试剂盒 |
| BTN60306 | 柱式血液DNA提取试剂盒 |
| BTN160905 | 动物RNA提取试剂盒(柱式提取)(无需*仿) |
| BTN140430 | 大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞 |
| BTN130628 | λ核酸外切酶 |
| BTN120406 | 柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒 |
| BTN131009 | NP40裂解液 |
| BTN3674 | 一管式病毒DNA提取试剂盒 |
| BTN90503 | 电泳级甘油 |
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