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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bst DNA Polymerase, Large Fragment
- 库存:
420
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货大片段Bst DNA聚合酶厂家直销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货大片段Bst DNA聚合酶厂家直销
英文名:Bst DNA Polymerase, Large Fragment
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:WE0236
规格:800U|4000U
本品是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶,其基因来源于Bacillus stearothermophilus,并在原始序列的基础上进行了部分点突变。该蛋白 具有5"→3" DNA聚合酶活性,无5"→3"和3"→5"核酸外切酶活性,具有强链置换活性。应 用于DNA等温扩增(LAMP)、多重置换扩增(MDA)、全基因组扩增(WGA)、建 库测序等。
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·2×Bes Taq MasterMix(含染料)
编号:WE0104
英文名称:2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
规格:1ml|5ml|25ml
本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,超过98%的PCR扩增能一次成功,同时复杂模板也能得到有效扩增,并可最大限度地减少人为误差和污染。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml | 25ml |
| 2×Bes Taq MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
注意:2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Bes Taq MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京现货大片段Bst DNA聚合酶厂家直销关键词:大片段Bst DNA聚合酶,WE0236,Bst DNA Polymerase, Large Fragment
87-51-4 3-Indole acetic acid(IAA) 吲哚-3-乙酸
288-32-4 Imidazoie 咪唑
ARB13593 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)elisa测定使用说明书 Rabbit anti-neutrophil granules antibody,anga ELISA KIT
ARB12332 大鼠卵白蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)含量分析 Rat ovalbumin specific ige,ova-slge ELISA KIT
103476-89-7 Leupeptin 亮抑酶肽(原装)
ARB12110 大鼠可溶性E选择素(sE-selectIn)elisa检测说明书 Rat soluble e-selectin,se-selectin ELISA KIT
BTN131156 山羊抗兔IgG,异硫"青"酸荧光素标记 Goat Anti-Rabbit IgG ,FITC Conjugate
对*基*磺酰胺 Metol 63-74-1
ARB10695 人肌球蛋白轻链(MLC)ELISA检测服务 Human myosin light chain,mlc ELISA KIT
2-*基芴 BOC-Glycine 153-78-6
BTN130618 T7 DNA聚合酶(未修饰) T7 DNA Polymerase(unmodified)
528-50-7 D-(+)纤维二糖
酵母聚糖A L-Alanine methyl ester hydrochloride 58856-93-2
CYB161060 狗IgG(冻干粉)
ZCNXQ02 超级胎牛血清 500ml
ARB10373 人甘油三酯(TG)含量测试 Human triglyceride,tg ELISA KIT
北京现货大片段Bst DNA聚合酶厂家直销关键词:大片段Bst DNA聚合酶,WE0236,Bst DNA Polymerase, Large Fragment
·山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0380
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG
规格:100μl
本产品为经抗原亲和纯化未标记的山羊抗兔IgG抗体,特异识别兔IgG,可与各种酶、荧光素等标记后用于免疫学、分子生物学及临床医学各个学科中,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
抗体浓度:2 mg/ml
防腐剂:无
·柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)
编号:WE0318
英文名称:Citrate Buffer(100×)
规格:100ml
福尔马林固定时,组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。本抗原修复液适合于大多数的抗原,用该修复液修复后阳性染色明显增强,抗原定位理想。
注意事项:
1、请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
操作步骤:
1、高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2 分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是最常用的热修复法。
2、微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。
3、沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中,并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
储存条件:2~8℃
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