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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bst DNA Polymerase,Large Fragment
- 库存:
972
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京大片段Bst DNA聚合酶现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京大片段Bst DNA聚合酶现货
编号:BTN100209
产地:国产|进口
规格:800U
英文名:Bst DNA Polymerase,Large Fragment
Bst DNA聚合酶大片段是将缺少5´→3´外切核酸酶结构域的Bacillus stearothermophilus(嗜热脂肪芽孢杆菌)DNA聚合酶基因在E.coli中表达纯化而得。
产品特点:
1. 5´→3´DNA聚合酶活性,但不具有5´→3´外切核酸酶活性,因此没有纠错功能。
2. 嗜温性,最适反应温度为68℃,建议反应温度不要超过70℃。
3. 强链置换能力,可以用于DNA链置换反应和LAMP扩增。还可用于68℃DNA测序(该条件尤其适用于富含GC的模板和纳克级的模板)。
4. 不能用于热循环测序或PCR,80℃ 10分钟即可失活。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 100μl |
| 10×Bst Buffer | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存、有效期一年。长期贮存需补加100μg/mL BSA或0.1% Triton X-100。
1×Bst DNA聚合酶Buffer的组成:20mM Tris-HCl(pH8.8 @ 25 ℃),10mM KCl,10mM(NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1% Triton X-100
活性定义及检测条件:1 U 指65℃条件下,30分钟内使10nmoL的dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性检测条件为:50mM KCl,20mM Tris-HCl(pH8.8),10mM MgCl2,30 nM M13mp18 ssDNA,70 nM M13 测序引物(-47)24 mer,200μm dATP,200μm dCTP,200μm dGTP,100μm[3H] dTTP,100μg/mL BSA和酶,65℃温育。
贮存条件:50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,0.1mM EDTA,0.1% Triton X-100和50%甘油,贮存于-20℃。
想要了解更多关于北京大片段Bst DNA聚合酶现货的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·酸酚
编号:BTN100803
英文名称:Acidic Phenol
规格:100mL
本品是将重蒸馏用乙酸*酸性缓冲液充分饱和而得,pH在4-5之间,不会再吸收样品的水分,可以直接用于RNA提取。
储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。
疑难解答:
Q:离心后为何酚相在下面?
A:*酚的比重是1.071,水饱和*酚的比重更低,只比纯水稍重。如果水溶液中有较高浓度的盐和其他成分(细胞裂解后也会释放出大量的如核酸,糖分等细胞成分),其比重很容易超过*酚,在此情况下离心,*酚将在下层,水相将在上层,取样时需要十分小心。如果要使*酚相在下层,可以使用比重更大的酚-*仿-异戊醇混合液。
·TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒
编号:BTN90605B
英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| TdT缓冲液,5× | 20μl |
| TdT(末端转移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 标记核苷酸 | (A、B、C不同,见注) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
| 成份 | 用量 |
| 探针DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
| 标记核苷酸,1mM (A型需自备标记核苷酸) |
1μl |
| dATP,2mM | (见下注) |
| TdT末端转移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超纯水 | 补到20μl |
注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。
北京大片段Bst DNA聚合酶现货关键词:Bst DNA Polymerase,Large Fragment,大片段Bst DNA聚合酶,BTN100209
·一步式细菌DNA提取试剂盒
编号:BTN60806
英文名称:One-step Bacteria DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一步裂解式超快细菌基因组DNA提取试剂,其最大特点是快速,可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到10分钟(对一个样品而言)。
2.产率一般在3-10μg/mL过液培养细菌。
3. OD260/280一般在1.8以上。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5.适用范围广,可以使用于绝大多数细菌。
6. 也可以使用过夜培养细菌和菌落。
7. 得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶菌酶 | 600mg |
| 一步式细菌裂解液 | 25ml |
| 专用上柱液 | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要冰袋运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一: 对革氏阴性细菌
1. 如果一步式裂解液产生沉淀,需要65℃预热直到沉淀溶解,摇匀待用。
2. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心中,室温12000rpm离心1分钟沉淀细菌,弃上清。
3. 加入0.5mL一步式细菌裂解液到离心管中,吹打混匀。
4. 加入0.5mL专用上柱液到裂解液中,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
5. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
6. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
7. 重复第6步操作一次。
8. 空甩半分钟,将离心吸附柱转移到新的离心管中。
9. 加50-100μL DNA洗脱液,室温放置3~5分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
二: 对革氏阳性细菌
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的细菌离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(60mL自备超纯水+600mg溶菌酶),颠倒混匀5-10次后37℃保温30分钟(有的菌种可能需更长时间,需要自己根据细菌不同而决定)。
2. 12000rpm离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接革氏阳性细菌处理的第3步。
北京大片段Bst DNA聚合酶现货关键词:Bst DNA Polymerase,Large Fragment,大片段Bst DNA聚合酶,BTN100209
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