大肠杆菌TG1电击感受态细胞价格厂家

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应大肠杆菌TG1电击感受态细胞价格厂家，产品信息：

类别：克隆与表达

英文名：E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell

产品名	产品编号	包装规格
大肠杆菌TG1电击感受态细胞	BTN160801	50μL×5

产地：国产|进口

品牌：百奥莱博

规格：50μL×5

英文名：E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell

 TG1电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。TG1 来源于E. coli K-12菌株，是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株，在平板上37℃，7小时可见克隆，是主要的噬菌体展示用菌株，同时也可用于普通质粒的构建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。TG1电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010cfu/μg DNA。

 

菌株基因型：[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)。

 

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

 

自备试剂：目的DNA、SOC培养基等。

 

使用方法：

1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。

2. 取-80℃保存的TG1电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。(注：对于质粒，测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19；对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl，pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100 ng/μL，体积不超过5μl/50μl感受态。)

3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。

4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV(此为BioRad电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作)，将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。

5. 2分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入1mL 不含抗生素的无菌SOC培养基(室温)，用1mL 枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到50mL离心管(BD Falcon 50mL 锥形离心管等)，向离心管中补加SOC培养基至10mL。倾斜45 度放入摇床，37℃，225 rpm 复苏60分钟。

6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200μl 涂布到含相应抗生素的SOC 平板上(因菌量较大，若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。

 

注意事项：

1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。

2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。

3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。

4.电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。

5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。

6. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。

7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

8.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。

大肠杆菌TG1电击感受态细胞价格厂家专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：BTN160801,E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell,大肠杆菌TG1电击感受态细胞

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关于大肠杆菌TG1电击感受态细胞价格厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

编号	类别	名称
BTN100874	核酸电泳和回收	DNA尿素-PAGE上样液
BTN120696	克隆与表达	土霉素盐*(代"酸")盐溶液
BTN3191	RNA纯化	Tris饱和酚
BTN101123	蛋白质研究	PVDF膜(0.45μm，13×20cm)
BTN130401	DNA纯化	海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)
BTN131179	核酸扩增(PCR)	核酸稀释液，测OD专用
BTN140209	蛋白质研究	考马斯亮蓝R-250染色液
BTN120406	DNA纯化	柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒
BTN90313	其他生化试剂	10×TBE电泳液
BTN130889	蛋白质研究	昆虫细胞裂解液
BTN60911	DNA纯化	硅胶膜离心吸附柱系列(小量提取)
BTN81220	RNA纯化	昆虫RNA柱式提取试剂盒
BTN120623	工具酶	β-琼脂糖酶Ⅰ
BTN70401	RNA纯化	软骨RNA提取试剂盒
BTN130897	其他培养基	YPDG液体培养基
BTN130906	探针标记及检测	超级杂交液(原位杂交)
BTN100908B	蛋白质研究	一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)
BTN100102A	蛋白质研究	His标记蛋白质微量纯化套装
BTN131103	蛋白质研究	生物素化山羊抗亲和素
BTN131055	蛋白质研究	TCEP盐*(代"酸")膦
BTN130632	工具酶	T7核酸外切酶
BTN90303	DNA纯化	硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取)
BTN80904	RNA纯化	柱式真菌RNA大量提取试剂盒
BTN90311	蛋白质研究	电泳级Tricine干粉
BTN130842	RNA纯化	葡萄球菌RNA提取试剂盒

 

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