大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞 克隆与表达

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞 克隆与表达，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞 克隆与表达
规格：10*100μl
英文名：E.coli XL2-Blue Rosetta Competent Cell
品牌：百奥莱博
编号：BTN140376
 本产品为采用大肠杆菌XL2-Blue菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可109，-80℃ 保存几个月转化效率不发生改变。

基因型：Tet RΔ(mcr A)183 Hte[F′ {pro AB lac Iq lac ZΔM15 Tn10(TetR)Amy CamR}]Δ(mcr CB-hsd SMR-mrr)173 end A1 sup E44thi- 1 rec A1 gyr A96 rel A1

储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期6个月。

想要了解更多关于大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞 克隆与表达的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·Deep Vent DNA聚合酶
编号：BTN131195
英文名称：Deep Vent(exo-) DNA Polymerase
规格：100U
Deep Vent DNA聚合酶是一种高保真的耐热DNA聚合酶，具有高保真性的原因，部分是由于其自身具有 3´→ 5´核酸外切酶校读活性。Deep Vent DNA聚合酶比 Vent DNA聚合酶在 95℃ 到 100℃ 之间更稳定，其在 100℃的半衰期是8小时。Deep Vent(exo-)DNA聚合酶是利用基因工程技术去除了Deep Vent DNA聚合酶的3´→5´核酸外切酶校读活性而得。

产品特点：
1．常规PCR
2．高保真度PCR
3．可扩增复杂模板(富含GC)

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


·miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)
编号：BTN90203
英文名称：miRNA isolation Kit(precipitation method)
规格：50次
microRNA(miRNA)和RNA干扰研究是当今分子生物学研究的一大热点，但快速分离和纯化相关的小RNA十分棘手，是目前研究 miRNA的主要技术障碍之一。目前国外相关产品寥寥无几，并且基本采用先提总 RNA 再富集其中的小RNA的两步法策略，国内相关产品更是一片空白。百奥莱博为满足广大用户的需求，开发了具有自主知识产权的本产品。

试剂盒特点：
1.从总 RNA中直接分离纯化小RNA，不需要使用离心吸附柱。得到的小RNA 长度大部分在 200nt以下，包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 操作简单快速，整个过程只需要约30分钟。
3.小RNA 纯净，OD260/280一般都在 1.9以上。
4.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA，但会有少量残留大 RNA，如果需要纯度更高，可以选择 PAGE 回收法。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	10ml
溶液C	50ml
RNase-free 水	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在纯化好的100μl 总 RNA(含大 RNA和小RNA)中，加入50μl溶液A，振荡 30秒混匀。如果 RNA样品体积不足 100μl，可以用RNase-free水补足，如果体积超过 100μl，可以用本公司核酸浓缩剂浓缩到 100μl。
2.室温 12000～15000g离心 30分钟。小RNA在上清中，大 RNA在沉淀中。
 注意：离心时间不能短于30分钟，否则大 RNA沉淀不充分。
3.小心将上清液转移到干净的1.5mL RNase-free塑料离心管中。留下的沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA电泳对照用。
4.在上清液中加入200μl溶液B，振荡 30秒混匀。
5.室温 12000～15000g离心 10分钟，小心弃上清。由于溶液B中有惰性的助沉剂，所以得到的小RNA沉淀肉眼可见。
6. 加入1mL溶液C，震荡数秒。
7.室温 12000～15000g离心 10分钟，小心弃上清。
8. 短暂离心数秒，小心吸弃残留液体(约50μL左右)。
9.在沉淀中(含小RNA)加入30-100μl RNase-free 水，吹打溶解即得小RNA溶液。注意：不能只吹打管底部分，还需要吹打整个离心管管壁的离心面部分，因为上面也有有小RNA沉淀。
10. 最好先 PAGE-银染检测小RNA 纯度再使用。


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·放线菌*(代"酮")
编号：BTN120688
英文名称：Actidione Solution
规格：1mL
本品为浓度为100mg/mL放线菌*(代"酮")的甲醇溶液。放线菌*(代"酮")(Cycloheximide from microbial；CHX；Naramycin A)，化学式C15H23NO4分子量281.35，外观无色晶体熔点119.5-121℃。易溶于甲醇、乙醇和丙*(代"酮")，微溶于水。放线菌*(代"酮")拥有非常强烈的毒性，包括损害DNA、导致畸形胎儿和其它对繁殖过程的效应等，一般只用在体外研究中。放线菌*(代"酮")是一种在真核生物中对蛋白质生物合成过程有抑制效应的化合物，它是灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的一种产物。它通过干扰蛋白质合成过程中的易位步骤而阻碍翻译过程。在分子生物学中放线菌*(代"酮")可用来确定蛋白质(酶)的半衰期；可作为植物生产调节剂；可用于筛选CHX抗性的酵母和真菌菌株。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期6个月。


大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞 克隆与表达关键词：BTN140376,大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞,E.coli XL2-Blue Rosetta Competent Cell


·一管式病毒RNA提取试剂盒
编号：BTN3073
英文名称：One-tube virus RNA extraction kit
规格：100次
本试剂盒是专用于血清(血浆)等液体样品中提取病毒RNA的纯化试剂。本产品回收率极高,尤其适合于整合到临床RT-PCR检测试剂盒中。且能用于提取其他液体样品和微量样品。

产品特点：
1. 回收率达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2. 灵敏度高，RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50-100拷贝/mL(对HIV和HCV)。
3.一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。
4. 无毒环保，不需要使用*酚和*仿等有毒的有机溶液。
5.可放量，如果加上病毒离心富集步骤，每管最多可以处理样品1.5mL。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。
2. 用于制备血浆的全血在2-25℃放置的时间不能超过6小时，在此时间内，可以室温800-1600g离心20分钟，上清即为血浆。
3. 血浆可以在2-8℃或更低温度下运输，可以在室温放置一天，2-8℃放置5天，-20℃以下长期保存。
4. 血浆最好按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。
5. 实验前所有试都必须放置在室温。
6. 实验当天新鲜配制70%的乙醇。

二：病毒提取操作
1. 标记1.5-2mL螺旋盖塑料离心管(如Sarstedt CAT#:782.694.006)，为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。注意设置阳性和阴性对照。
2. 每管(包括正负对照管)中加入0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液(需提前融化)。
3.快速震荡样品几秒，再短暂离心，取0.2mL液体样品加入到已经装有0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液的管中。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体样品在4℃ 24,000 g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL上清后在取用样品。
4.在正负对照样品管中分别加正负对照样品。
5.室温放置10分钟。此间可以在每个管上做个标记，以在下步区别向心面和离心面。
6. 振荡数秒后加入0.7mL室温异丙醇，旋紧盖后振荡30秒混匀，把离心管的向心面对向转头的中央，13,000-15000g室温离心至少15分钟。
7.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时可能看不见)。
8. 加入1.0mL室温70%乙醇，振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。注意：在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。
9.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
10. 再短暂离心数秒，用移液器移弃残留液体(70%乙醇)，否则它会影响后续反应。
11. 加入200μl RNase-free水或百奥莱博的1×液相RNase Scavenger(能灭活残留的RNase，而RNase-free水无此功能)，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状RNA沉淀，溶液将呈混浊状,含少量不溶物。由于不溶沉淀物中含有RNA，所以不要离心后取上清使用，必须取混合液使用，哪怕很浑浊。
12. 直接取适量用于RT-PCR，如果溶于200μl水,同时样品使用量不超过RT-PCR体系的1/2，不溶物一般不会影响RT-PCR。剩余样品可以室温放置2小时，也可保存于-80℃保存一个月。

疑难解答：
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万个RNA分子)，同时其长度也十分有限(是细胞基因组的万分之一以下)，样品中病毒数往往也不是很多，使得样品中核酸的绝对量几乎是微乎其微，十分容易丢失。另外，由于得到的核酸量少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR检测，而病毒RNA往往具有稳定的二级结构，进一步增加了鉴定的难度(即不知道是RNA提取的问题还是RT-PCR的问题)。
Q：如何判断是病毒RNA没提取出来还是提取出来了但没有RT-PCR成功？
A：在RT-PCR反应中加阳性和阴性对照。

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