大肠杆菌TG1电击感受态细胞厂家直销

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百奥莱博专业生产供应大肠杆菌TG1电击感受态细胞厂家直销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：大肠杆菌TG1电击感受态细胞厂家直销
编号：BTN160801
品牌：百奥莱博
规格：50μL×5
产地：国产|进口
 TG1电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。TG1 来源于E. coli K-12菌株，是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株，在平板上37℃，7小时可见克隆，是主要的噬菌体展示用菌株，同时也可用于普通质粒的构建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。TG1电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010cfu/μg DNA。

菌株基因型：[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC培养基等。

使用方法：
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的TG1电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。(注：对于质粒，测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19；对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl，pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100 ng/μL，体积不超过5μl/50μl感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。
4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV(此为BioRad电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作)，将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。
5. 2分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入1mL 不含抗生素的无菌SOC培养基(室温)，用1mL 枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到50mL离心管(BD Falcon 50mL 锥形离心管等)，向离心管中补加SOC培养基至10mL。倾斜45 度放入摇床，37℃，225 rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200μl 涂布到含相应抗生素的SOC 平板上(因菌量较大，若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。

注意事项：
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。

关于大肠杆菌TG1电击感受态细胞厂家直销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·牛血清白蛋白封堵液
编号：BTN131236
英文名称：BSA Blocking Solution
规格：250mL
本产品可用于所有封闭应用，包含A型Blocker BSA in PBS(10×)和B型Blocker BSA in TBS(10×)。

产品特点：
1．10%高质量牛血清白蛋白溶液。
2．浓缩工艺节省存储空间。
3．液体浓缩液稀释后即可使用，无须等待粉末的溶解。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞
编号：BTN140576
英文名称：E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组Bacmid。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达107CFU/μg。
 DH10Bac细胞包含亲本Bacmid bMON14272和辅助质粒 pMON7124。亲本Bacmid 包含一个mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和lac Zα-互补因子。
 辅助质粒包含tns ABCD 区域，该区域提供了mini-Tn7从供体质粒插入亲本Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如pFastBac 系列质粒(pFastBac1，pFastBacDual等)含有Tn7R和Tn7L 同源重组臂，Tn7R和Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和SV40 病毒的PolyA 加尾信号。当含有靶基因pFastBac的重组质粒转化到DH10Bac细胞后，发生重组后就可产生重组Bacmid，提取纯化重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9或Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac细胞中的The φ80dlacZDM15基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组bacmid的蓝白斑筛选。
 菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ-rpsL nupG/pMON14272/pMON7124。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，避免反复冻融，有效期半年。

自备试剂：重组质粒、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10μg/mL tetracycline，100μg/mL X-gal，40μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
4. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
5. 每个离心管中加入900μl 无菌的SOC(不含抗生素)，混匀后置于37℃ 摇床，200rpm 振荡培养4小时。
6. 用 SOC培养基进行10倍梯度稀释，如分成3个稀释梯度10-1,10-2,10-3。
7. 取 100μl的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，37℃培养24-48小时。
8. 保留剩余的菌液保存于4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·增强型DAB显色试剂盒
编号：BTN81223
英文名称：Enhanced DAB Chromogenic Kit
规格：100mL
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂，适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物，可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量，进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下：


产品特点：
1．即开即用，不需要用户准备任何材料。
2．DAB以干粉提供，方便运输。
3．可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4．跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5．显色过程中需要避光，在显色后可拍照或扫描。

试剂盒组成：

 

成分	规格
DAB干粉	100mg
10mL棕色塑料瓶	1个
DAB溶解液	100ml
增强剂	1ml
H2O2	1ml
说明书	1份

 注意：本产品可以配制100mL增强型DAB显色液，但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期1年

自备试剂：超纯水、HRP标记物(抗体或探针)处理过的印迹膜。

使用方法：
1．从DAB溶解液中取5mL到一个10mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供)，将100mg DAB干粉全部加入，充分振荡混匀，所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完，可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2．按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量，并按下表配制DAB显色液(此处以配制10mL为例，用户如需要配制其他体积，可按比例增减各成分用量)：

成分	用量
DAB溶解液	9.4ml
20×DAB浓缩液	0.5ml
增强剂	0.1ml
H2O2	10μl

 注意：此溶液必须立即使用。
3．如果是印迹膜，则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中，室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟，最长不超过10分钟，具体跟靶分子浓度密切相关)，迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分，照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4．如果是组织切片，则直接将DAB染色液滴加在切片上，室温避光放置10分钟，然后浸在超纯水中数次，空气中干燥后显微镜下检测或照相。


大肠杆菌TG1电击感受态细胞厂家直销关键词：BTN160801,大肠杆菌TG1电击感受态细胞,E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell

CYB164003 羊抗人C3-HRP
ARB14145 大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)代做ELISA实验 
SJ0711 goldview
ARB12079 大鼠内皮脂肪酶(EL)Elisa方法检测 Rat endothelial lipase,el ELISA KIT
6-*嘌呤 Rink Amide AM resin 87-42-3
D0102 脱纤维新生牛血(无菌 袋装)
BL1425 1M Tris-HCL (PH6.8)
ARB10045 人Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)代做ELISA实验 Human collagen type Ⅲ,col Ⅲ ELISA KIT
亚麻酸 Flavourzyme 463-40-1
ARB13199 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)Elisa方法检测 Mouse lipoprotein lipase,lpl ELISA KIT
ARB11156 人周期素依赖性激酶2(CDK-2)代做ELISA实验 Human cyclin-dependent kinase 2,cdk-2 ELISA KIT
PY02-429  假单胞CFC选择性培养基基础  250克  
F020211 兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG
137-16-6 Sodlum Lauroylsarcosine 十二烷基肌*酸*

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