北京现货SABC免疫组化试剂盒(小鼠IgG)(FITC荧光/

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北京现货SABC免疫组化试剂盒(小鼠IgG)(FITC荧光/DAB显色)库存
产地：国产|进口
编号：QN1220
规格：100T-200T
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG来源的免疫组化实验.提供DAB及FITC两种显色选项。

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶或者FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶与FITC将保证SABC具有很高的敏感性。

试剂盒组份：
封闭液(5% BSA)—————————————10ml
Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液-—————————100ul
SABC-FITC浓缩液-————————————100ul
SABC-POD浓缩液—————————————100ul
稀释液—————————————————30ml
20×DAB显色液A—————————————1ml
20×DAB显色液B—————————————1ml
抗荧光衰减封片剂————————————10ml

操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)
1、切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC，可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
2、热修复抗原：将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0)，电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3、滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4、用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37℃ 1小时孵育左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5、根据使用量，用稀释液将bio-羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul bio-羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液，20-37℃ 处理30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。如果用荧光观察，请接步骤6、7，如果用DAB显色，请直接转至步骤8。
6、根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃，30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
7、滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
8、根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液，混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃，30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
9、DAB显色:根据用量，用PBS(pH7.2-7.4)配制，按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A，加入50ul 20×DAB显色液B，混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
10、苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

对于细胞爬片：常规固定后，PBS漂洗两次，再用0.5%Txiton X-100室温20分钟，PBS漂洗两次，3%H2O2(如果用FITC，刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次，下接上面第4步。
对于冰冻切片：固定后，可用PBS漂洗两次，再接上面第二步。

注意事项：
1、如果用DAB染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01-0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。
2、如果用FITC观察背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗涤2次，然后封片观察。
3、因为免疫组化指标众多，标本不一，此步骤仅作参考。

储存条件：-20℃

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·亲和素
编号：QN0732
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规格：1mg
亲和素是由4个分子量为16kDa的亚单位组成的糖蛋白，每单位可结合1ug的生物素(Biotin)，用于生物素-亲和素-免疫印迹技术。

CAS号：1405-69-2
纯度：＞95.0%蛋白质
性状：白色粉末
溶解性：溶于0.1M磷酸盐缓冲液pH6.8，参考浓度1mg/ml
活性：＞10U/mg
储存条件：−20℃

·盐*(代"酸")多巴胺
编号：QN0617
英文名称：Dopamine hydrochloride
规格：5g
本品是一种生化试剂，仅用于科研领域。

别名：3-羟基酷胺盐*(代"酸")盐;3-羟酪胺;多巴胺盐*(代"酸")盐
CAS号：62-31-7
分子式：C8H12ClNO2
分子量：189.64
纯度：＞98%
性状：白色针状结晶或结晶性粉末
储存条件：-20℃

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编号：QN0811
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规格：25g|100g|500g
CAS号：51-05-8
分子式：C13H21ClN2O2
分子量：272.77
性状：白色结晶或结晶性粉末，无臭，味微苦。

·替硝唑
编号：QN0032
英文名称：Tinidazole
规格：25g
替硝唑具有抗滴虫作用。替硝唑最先在美国研制成功，是继甲硝唑(metronidazole MNZ)后的新一代疗效更高、疗程更短、耐受性好、不良反应低的抗厌氧菌及抗滴虫的甲硝咪唑类药物。国际上广泛用于厌氧菌感染和原虫疾病的预防和治疗、优于甲硝唑。用作科研实验研究。

CAS：19387-91-8
分子式：C8H13N3O4S
分子量：247.27
储存条件：RT

·氧化型辅酶Ⅰ
编号：QN0448
英文名称：NAD
规格：250mg|1g
CAS号：53-84-9
分子式：C21H27N7O14P2
分子量：663.43
储存条件：-20℃
性状：白色冻干粉

·去离子甲酰胺
编号：QN0640
英文名称：Formamide,Deionized
规格：100ml
CAS号：75-12-7
分子式：CH3NO
分子量：45.04
纯度：＞99.5
性状：无色微黏液体
储存条件：2～8℃

·考马斯亮蓝染色试剂盒
编号：QN0879
英文名称：Coomassie Brilliant Blue Staining Reagent(Staining Solution and Destaining Solution)
规格：100+500ML
本考马斯亮蓝染色试剂盒采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

试剂盒组分：
考马斯亮蓝染色液————————100ml
考马斯亮蓝脱色液————————500ml

使用方法：
1、电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。
2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染色需4小时以上。
3、染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效果会略有影响。
4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。

注意事项：
1、染色时间4小时以上效果最佳。
2、脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。
3、脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。
4、脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。

储存条件：室温保存，至少一年有效。


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