北京BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)价格厂家

北京BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)价格

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  • ¥170 - 1790
  • 百奥莱博
  • WE0324-QNF
  • 北京
  • 2025年07月07日
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      960

    • 英文名

      BCIP/NBT Kit(40×)

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)价格厂家
    编号:WE0324
    英文名:BCIP/NBT Kit(40×)
    品牌:百奥莱博
    规格:40ml
      BCIP是碱性磷酸酶最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

    试剂盒组成

     
    组份 40ml
    40×BCIP 1ml
    40×NBT 1ml
    BCIP/NBT Buffer 40ml


    注意事项
    1、工作液应现配现用,配制好的工作液1小时内有效。
    2、工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
    3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
    4、NBT有毒,使用时请采取必要的防护措施。
    5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。

    操作步骤
    1、BCIP/NBT显色工作液配制:根据需要量,将40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的体积比混匀后,即为BCIP/NBT显色工作液。
    2、显色:
    1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到BCIP/NBT显色工作液中),室温避光孵育3-10分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
    2)组织切片或细胞爬片显色:滴加适量的BCIP/NBT显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育3-10分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。

    储存条件:2~8℃

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    ·miRNA cDNA第一链合成试剂盒
    编号:WE0157
    英文名称:miRNA cDNA Synthesis Kit
    规格:25次
      本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾,之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终合成miRNA对应的第一链cDNA。

      miRNA cDNA第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录过程需要的全部试剂。该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率,可以从1ng-2μg的total RNA中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。并且操作简便、快捷,可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量。

    试剂盒组成
    组份 25次
    Tris-Hcl,1 mM,PH 8.0 1ml
    E.coli Poly(A)Polymerase,5U/μl 15μl
    10×Poly(A)Polymerase Buffer 80μl
    ATP,10 mM 15μl
    RT Primer,25μM 90μl
    5×UltraRT Buffer 120μl
    UltraPure dNTP Mix,10 mM each 30μl
    UltraRT 15μl
    RNase-Free Water 1ml


    备注:本试剂盒须与miRNA荧光定量检测试剂盒(WE0158)配套使用。

    自备实验材料:1ng-2μg的总 RNA,或0.1ng-1μg的小分子RNA。

    注意事项
    预防RNase污染,应注意以下几方面:
    1、使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
    2、玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
    3、配制溶液应使用无RNase的水。
    4、操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

    使用方法

    A.miRNA加Poly(A)尾的过程
    1、首先根据所用RNA的量,按如下公式,用1 mM Tris(PH8.0)来稀释10 mM ATP:
    ATP稀释系数=5000/__ng的总RNA
    例:如果总RNA的起始用量为100ng,那么ATP稀释系数=5000/100=50。即将ATP稀释50倍(1μl的10 mM ATP加49μl的1 mM Tris,PH8.0)。
    2、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入以下试剂至总体积25μl。
     
    试剂 25μl反应体系 终浓度
    total RNA Xμl 可达2μg
    10×Poly(A)Polymerase Buffer 2.5μl
    第“1”步中稀释好的ATP 1μl
    E.coli Poly(A)Polymerase, 5U/μl 0.5μl 2.5 U
    RNase-Free Water up to 25μl

    注意:反应中使用的total RNA必须含有小分子RNA。

    此过程也可以直接使用小分子RNA(建议加入量为2-5μl。请根据目的miRNA的丰度来确定加入量)。

    3、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。37℃,孵育15分钟。此过程结束后,立刻进行第一链cDNA的合成,或于-20℃暂存。如需长期保存,建议存放于-80℃。

    B.修饰后的miRNA cDNA第一链合成的过程
    1、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入下表中试剂,至终体积20μl:
     
    试剂 20μl反应体系
    上述Poly(A)反应液 4μl
    UltraPure dNTP Mix,10 mM each 1μl
    RT Primer,25 μ M 3μl
    5×UltraRT Buffer 4μl
    UltraRT 0.5μl
    RNase-Free Water 7.5μl


    2、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。42℃,孵育50分钟。
    3、85℃,孵育5分钟,终止反应。合成的cDNA反应液可以直接进行荧光定量检测实验,也可以于-20℃保存备用。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


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