WB内参阳性对照

特别提示：包括WB内参阳性对照在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：WB内参阳性对照
英文名称：WB internal reference positive control
产品货号：SNM429
产品规格：100ug



除了WB内参阳性对照,，我公司还供应以下相关产品：



名称：3mL亲和层析柱
货号：BTN140650
规格：3mL
本产品适用范围广泛，可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子；还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。

亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等)，通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。

亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法，其示意图如下：


储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

常用亲和标签及纯化方案：


名称：蛋白酶抑制剂混合液
货号：BTN80808
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量的内源性蛋白酶，引起蛋白质的降解，影响试验结果。加入外源性蛋白酶抑制剂，抑制蛋白酶的活性，防止蛋白降解，已经成为蛋白质研究的常规操作。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝氨酸蛋白酶(Serine Protease)、半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease)、天门冬氨酸蛋白酶。
3.与各种细胞裂解液兼容，可以共同使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：临用前室温融解蛋白酶抑制剂复合物(100×)，混匀，按照1:100 比例加入到组织细胞裂解液中。

注意事项：
1.蛋白酶抑制剂复合物在水溶液中极不稳定，15分钟即可水解掉～50%的活性，需临用前加入。
2. 避免反复冻融，可分装储存。

名称：甘氨酸(粉剂)
货号：SNM394
规格：500g

名称：显影粉
货号：SNM421
规格：10×250ml

名称：30% Acr-Bis (29:1)
货号：KFS077
规格：100ml|500ml
30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide 的水溶液，其中acrylamide 和bisacrylamide 的比例为29:1。

30% Acr-Bis(29:1)常用于配制*烯酰胺凝胶(PAGE 胶)，包括SDS-PAGE 胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。30% Acr-Bis是实验室的常用储备液。

储存：4℃，避光，有效期12个月。

名称：贝他定(苯丁抑制素)
货号：SY0330
规格：10mg
Bestatin，中文名贝他定或苯丁抑制素，是一种特异性靶向氨肽酶的金属蛋白酶抑制剂，竞争性抑制亮氨酸氨肽酶和氨肽酶B，IC50分别是20nM（以L-亮氨酸-β-萘基胺为底物）和60nM（以L-精氨酸-β-萘基胺为底物）。Bestatin也是一种有效且不可逆的LTA4水解酶抑制剂。

该化合物具有多种生理功能，如：
可作为一种免疫调节剂，促进人骨髓粒细胞-巨噬细胞祖细胞增殖；
可结合到细胞表面，并通过其固定到细胞表面的特性直接刺激淋巴细胞；
可用于多发性淋巴瘤研究；
借其肿瘤细胞增殖的抑制活性用于抗肿瘤研究。

CAS：58970-76-6
分子式：C16H24N2O4
分子量：308.37
外观：浅白色至白色粉末
纯度：＞99%（HLPC）
溶解性：溶于DMSO（2 mM)，1N NaOH（50mM），微溶于水
储存条件：-20℃，有效期3年
结构式：


注意事项
1）本品的有机溶剂如DMSO储存液建议分装冻存（≤-20℃），6个月稳定；
2）本品的工作液建议现配现用，存放不可超过一天；
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

名称：广谱蛋白酶抑制剂混合物(含EDTA，100X)
货号：ZN2920
规格：1ml
细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。本产品可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性，如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。

应用领域：
本产品适用于原代细胞，培养的哺乳动物细胞，动物组织，植物组织，酵母或细菌细胞等裂解物制备过程中蛋白的保护。

使用方法：
本蛋白酶抑制剂混合物为 100X 的储存液，使用时按照 1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml 裂解液中加入 10μl 蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。根据需要，0.1M 的 EDTA也按照 1:100 的比例加入到裂解液中。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后，就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。

注意事项：
1.传统的蛋白酶抑制剂(E-64, AEBSF, bestatin, leupeptin and aprotinin)是不能够抑制某些去泛素化(DUB)蛋白酶(例如 ATAXIN-3)的功能的。
2.本产品以 DMSO 为溶剂，操作时注意防护。
3.本产品使用前室温平衡至溶解。
4.本产品使用前需震荡，以保证各成分均匀。
5.本产品可以适当分装后保存，并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。
6.如用于检测金属蛋白酶活性，2D 电泳以及 IMAC,则不宜添加 EDTA。

保存：-20℃保存，12个月有效

名称：植物核蛋白提取试剂盒(无去垢剂)
货号：HR8039
规格：50T/100T
植物核蛋白提取试剂盒(无去垢剂组份)提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒的所有组份均不含去垢剂成分，最后得到的蛋白样品的成分对NI 柱纯化、分子筛、离子交换、亲和纯化等下游应用没有明显影响。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解植物核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒采用非酶法提取，提取过程简单方便，速度快，可在1小时内完成，而且绝少交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法较低。酶法提取制备的核蛋白，回收率提高，蛋白纯度高，保持天然活性，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒(相关产品HR8050)。请根据实际需要选择试剂盒。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用我公司其他货号的试剂盒。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理(相关产品HR0389)。
我公司可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒，包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去垢剂成分的蛋白提取试剂盒，总计300 多种蛋白提取试剂盒可供选择。我公司还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。提取液AB长期不用请置-20℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
1．正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3．禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4．样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5．最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6．实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
1．使用方便。
2．将蛋白提取的时间缩短至1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器
●离心机● 振荡器● Dounce匀浆器● 移液器●冰箱●冰盒
耗材
●离心管● 吸头
试剂
● PBS

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．提取液制备：
每100μl预冷的蛋白提取液C中加入1μl蛋白酶抑制剂，混匀后置冰上备用。
【注】：
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎，加入500μl-1000μl提取液A 后用匀浆机充分匀浆。
3．将匀浆用100um细胞筛过滤。
【注】：
● 没有细胞筛过滤条件可以将匀浆液稍微静置，待大的组织块等自然沉降，吸取上清即可。
●有些含黏液较多的组织样本难以吸取，可以将吸头尖部剪掉一点再吸。
4．将滤液在4℃，1000×g 力条件下离心5分钟。
5．弃上清，收集沉淀。
6．在沉淀加入适量提取液B 后用Dounce匀浆器充分匀浆。
7．收集匀浆液，4℃，1000g 力条件下离心10分钟。
8．弃上清，收集沉淀。
9.在沉淀中加入100-300μl试剂C，充分混匀。
10．置4℃振荡20-40分钟。
【注】：
●用摇床、振荡器等仪器的较低转速，保持试剂C 稍微晃动即可。
● 没有振荡条件的话可以置4℃静置，稍微延长静置时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
11.在4℃，12000×g条件下离心10分钟。
12．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到核蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】：
● 建议用BCA 法进行蛋白定量。相关产品：HR0329。
●蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
常见问题分析：
●蛋白浓度低？
植物核蛋白丰度比较低，在条件允许的情况下，尽可能增加样本量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当增加试剂A的匀浆次数，并适当延长试剂C的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白？
建议用BCA 法。不适合用Bradford 法，因为试剂A中含有干扰Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford 法定量。
● 提取时出现胶状沉淀？
蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。不检测和基因组DNA 结合特别紧密的特定蛋白的情况下，可以直接离心取上清进行后续实验即可；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理，300w/10秒间隔10秒，超声3分钟，随后离心取上清用于后续实验。检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，不必进行超声处理。
● 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。