蛋白胶微量回收试剂盒 蛋白质研究

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

蛋白胶微量回收试剂盒 是高品质的蛋白质研究产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多蛋白胶微量回收试剂盒等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：蛋白胶微量回收试剂盒 蛋白质研究
品牌：百奥莱博
规格：50次
英文名：Protein Gel Mini-Extraction Kit
十二烷基硫*(代"酸")*-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、*基酸组分分析或末端序列测定等。

产品特点：
1．简单，不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2．适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3．回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小，洗脱时间相关)。
4．跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序等。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	50ml
微型离心管专用研磨杵	50只

储存条件：常温运输，4℃保存(微型离心管专用研磨杵可以室温保存)，有效期一年。

使用方法：
1．按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2．切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)。
 注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3．将切下的胶块转移到1.5mL塑料离心管中。
4．用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5．加入20μL溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将溶液B放在冰箱预冷。
6．10000g离心10分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。
7．加入5倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。
8．-20℃放置至少10-30分钟。
9．室温12000g离心5-20分钟，弃上清。
10．室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。

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ARB10054 人Bcl-2相关X蛋白(BAX)Elisa定量检测 Human bcl-2 associated x protein, bax ELISA KIT
BTN120511 CpG 甲基转移酶(M.SssI) CpG Methyltransferase(M.SssI)
BL1406 2×SYBR Green PCR Mastermix
KT203 Long Taq PCR MasterMix
*酚蓝水溶液  1%|2% 10ml
2-羟yi基哌*(代"嗪") 2-Thiouracil 103-76-4
ARB12361 大鼠抵抗素(ResIstIn)Elisa分析 Rat resistin ELISA KIT
细胞核膜蛋白提取试剂盒   50T|100T
BL1269 0.01M PBS(干粉) PH7.2-7.4
E0604 脱纤维裂解绵羊血(无菌) 100ml/500ml
BFD068 牛结核抗体检测卡
多聚右旋赖*酸 DFIH 27964-99-4
ARB12016 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA代测服务 Rat α1-acid glycoprotein,α1-agp ELISA KIT
2,5-二羟基*甲醛 5-Nitrouracil 1194-98-5
ARB11472 人胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)含量测试 Human insulin-like growth factors 1 receptor,igf-1r ELISA KIT
蛋白胶微量回收试剂盒 蛋白质研究关键词：蛋白胶微量回收试剂盒,BTN90402,Protein Gel Mini-Extraction Kit


·植物RNA提取试剂盒2.0(无*仿柱式提取)
编号：BTN160907
英文名称：Plant RNA Column extraction kit 2.0
规格：50次
本试剂盒是无酚无*仿柱式植物RNA提取试剂盒(BTN160906)的升级产品。不仅不需要*仿处理，还解决了提取的植物总RNA中出现基因组DNA污染这一难题，提取的RNA通过PCR验证不含基因组DNA污染。

试剂盒特点：
1. 免酚和*仿处理，操作安全可靠。
2. 简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。
3. RNA 纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4. 目前已测试过上百种植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	100ml
膜反应液	2.5ml
RNase-free DNase(1U/μL)	0.5ml
RNA洗脱液	10ml

储存条件：常温运输，4℃保存，DNase低温运输保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNA保存液中的植物组织需用纸吸去RNA保存液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入1mL溶液A。
注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
4.室温12000～15000g离心3～5分钟，管底沉淀为细胞破碎物。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物，属于正常现象)，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
7. 将一半的溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到同一离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀产生，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
10. 12000rpm室温离心10秒以便去除残留液体。此步很重要，否则残留的通用洗柱液会抑制后续反应中DNase的活性。
11. 将10μl(10 U)的RNase-free DNase 加入到50μl 37℃预热的DNA膜反应液中，吹打混匀配制成DNase工作液。
12. 将DNase工作液在37℃预热1分钟，然后全部加入到离心吸附柱中，室温放置5分钟。注意：5分钟一般足够降解大多数情况下的DNA污染。如果DNA 没有彻底降解(可能由于样品中残留的杂质抑制了DNase的活性)，此步的保温时间可以适当延长到10分钟或15分钟。
13. 直接在离心吸附柱中加0.7mL 通用洗柱液，盖上盖后颠倒数次混匀。
14. 12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
15. 再加0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
16. 12000rpm室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇(通用洗柱液中的成分)会影响RNA的使用。
17. 将离心吸附柱转移到RNase-free 收集管中，加入30-50μl RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。
18. 13000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
19. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
20. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
21. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。


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·*苄青霉素溶液
编号：BTN60206
英文名称：Ampicillin Solution
规格：10mL
本产品是浓度为50mg/mL的*苄青霉素溶液，用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。

作用原理：能使细菌细胞膜内层的transpeptidase(转肽酶)失活从而抑制细菌细胞壁的合成。

抗性机制：抗性基因bla能特异性表达外周质酶β-lactamase(β-内酰胺酶)，该酶可切割*苄青霉素的β-内酰胺环从而使之失活。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月。

·超级电泳液(含染料)
编号：BTN151103A
英文名称：Superbuffer
规格：100mL
本品是我司开发的超级核酸电泳液套装，其中的溶液A含抗水解的核酸染料，用于配制琼脂糖凝胶(溶液A也可用于电泳，但不经济)；溶液B为不含染料的电泳液。

产品特点：
1.高浓度，溶液A和溶液B用去离子水稀释100倍后可以直接用作配胶工作液和电泳工作液，100mL的产品可以配制10 L工作液。
2.低产热，用溶液A配制的胶在溶液B配制的电泳液中电泳时可用30 V/cm的中等电压(cm是指电泳槽两电级之间的距离)，一般的mini胶电泳(如检查PCR扩增)只需要5-10分钟即可完成，比TAE和TBE快4-5倍(TAE和TBE电泳一般需要40分钟)。当然，也可以按常规的电泳参数电泳，所需时间约为40分钟左右。
3. 用本产品溶液A 配制的琼脂糖凝胶可以在TBE和TAE缓冲液中低压电泳。用TBE 配制的琼脂糖凝胶也可以在本产品溶液B配制的电泳液中电泳(低压中压均可)。但用TAE 配制的胶不能在溶液B中电泳。
4. 用本产品电泳得到的DNA片段的胶回收率高于使用TAE和TBE电泳的胶回收，不影响后续的DNA胶回收和DNA连接等反应。
5.溶液A(配胶用)和溶液B(电泳用)均可以单独购买。

产品组成：

成分	A型	B型
溶液A(配胶液，含染料)	100ml	-
溶液B(电泳液，不含染料)	-	100ml
说明书	1份	1份

储存条件：常温保存和运输，有效期两年。如果本产品有沉淀析出现象，请65℃水浴溶解后使用。

使用方法：
将本品溶液A用去离子水稀释100倍(1mL溶液A加99mL去离子水)，混匀后直接用于配琼脂糖胶，溶液B用去离子水稀释100倍(1mL本产品加99mL去离子水)后直接用于做电泳液，其余操作跟TAE，TBE缓冲液一样。需注意的地方是：

1.电压：对一般minigel，一般可以用250-350V 跑5-10分钟；对大的电泳槽，可用400-450V 跑5-10分钟。若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象，请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限。若继续存在，可能需要更换新的缓冲液。
2. DNA条带扭曲：DNA样品中所含SDS量过高时(SDS 主要来于上样液)，DNA条带将出现扭曲，影响实验效果。建议使用不含SDS的上样液，最好使用跟我公司超级电泳液兼容的上样液。
3. 反复使用：本溶液A配制的电泳液至少可以重复使用2-3次，如果使用大电泳槽，可以重复使用的次数会更多。
4. TBE胶：已经用TBE电泳液配置好的琼脂糖凝胶，如果不含EB，SYBR Green等染料，则可以直接放入本产品溶液A配制的电泳液中按上述电泳条件电泳(因为溶液A含染料，故不需要额外再加染料)。如果用TBE电泳液配置好的琼脂糖凝胶含EB、SYBR Green或绿如蓝等核酸染料，则可以直接在本产品溶液B配制的电泳液中进行电泳。
5.溶液A配制的胶在TAE或TBE电泳液中电泳：已经用本产品溶液A配置好的琼脂糖凝胶，也可以直接在TBE或TAE电泳液中电泳，电压跟常规TAE或TBE电泳一样。

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