北京限制性内切酶HinfI现货

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京限制性内切酶HinfI现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京限制性内切酶HinfI现货
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：BTN17-0090
规格：2000 U
HinfI限制性内切酶识别位点：
5´...G↓A N T　C...3´
3´...C　T N A↑G...5´

产品组成：

 

成分	规格
HinfI，10U/μL	2000U
Buffer A，10×	1.0mL
Buffer B，10×	1.0mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存。

贮存Buffer：10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃)，100mM KCl，1mM DTT，1mM EDTA，0.2mg/mL BSA，50% glycerol。

1×Buffer A：10mM Tris-HCl(pH8.5)，10mM MgCl2，100mM KCl，0.1mg/mL BSA。

1×Buffer B：33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃)，10mM 醋酸*，66mM 醋酸*，0.1mg/ml BSA。

活性定义：一个活性单位是指50μL反应体系中，37℃条件下，1小时内将1μg的lambda DNA片段完全分解所需的酶量。

热灭活：65℃加热20分钟

使用方法：
1．单酶切DNA：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
nuclease-free water	16μL
10×Buffer A	2μL
DNA(0.5-1μg/μL)	1μL
HinfI	0.5-2μL

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2．双酶切或多酶切DNA：
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer)，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3．直接酶切PCR产品：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
PCR reaction mixture	10μL(约0.1～0.5μg DNA)
nuclease-free water	18μL
10×Buffer A	2μL
HinfI	1-2μL

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。

北京限制性内切酶HinfI现货正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·OPD干粉
编号：BTN131115
英文名称：o-phenylenediamine dihydrochloride
规格：25g
OPD和HRP反应时生成水溶性橙黄色产物，在492nm时有最大吸收峰。

储存条件：常温运输，避光保存，有效期一年。

·10×TBE电泳液
编号：BTN90313
英文名称：o-phenylenediamine dihydrochloride
规格：250mL
OPD和HRP反应时生成水溶性橙黄色产物，在492nm时有最大吸收峰。

储存条件：常温运输，避光保存，有效期一年。

·DNA甲基化修饰试剂盒
编号：BTN130301
英文名称：Embedded Bisulfite Modification Kit
规格：150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。

产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)。

试剂盒组成：

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注: 包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。

储存条件：低温运输、4℃保存、避免反复冻融，有效期一年。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在 80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA将呈单链。
9．吸弃处理液A后，用1mL新鲜配制的处理液B(注：不是溶液B，配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA不超过700 ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750μL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底，得到1个包埋块。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作6次(步骤23)，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。


北京限制性内切酶HinfI现货关键词：HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090,限制性内切酶HinfI

BL1314 Pfu DNA Polymerase
H0301 新生牛血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/500ml/500ml*20
FMOC-D-*丙*酸 QAE Sephadex A-50 86123-10-6
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DP115 N96快速质粒提取试剂盒
雄酮 HA 53-41-8
DP208 超薄琼脂糖凝胶回收试剂盒
004001 小牛胸腺DNA 50mg|100mg
BTN80930 微量样品核酸提取试剂盒 Tiny Sample DNA-RNAOUT
6106-21-4 Succinic acid Sidium 琥珀酸*
BL1120 柠檬酸*缓冲液0.01mol/L， pH6.0，干粉
F040307 小鼠IgG1抗原 Mouse IgG1
BTN130419 内毒素清除专用亲和介质 Endotoxin Removal Resin
CYB164011 羊抗人IgG(1：500～2000)-HRP
CYB167006 羊抗人IgA(α链特异)
北京限制性内切酶HinfI现货关键词：HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090,限制性内切酶HinfI

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BTN100910 长效期SDS-PAGE还原剂 SDS-PAGE Reducing Agent
BTN120415 终点显色法内毒素定量试剂盒 Chromogenic End-point TAL Kit
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F030817 BIOTIN标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*BIOTIN
CYB167082 兔抗猪IgG
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