北京现货限制性内切酶HinfI厂家

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百奥莱博专业生产供应北京现货限制性内切酶HinfI厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货限制性内切酶HinfI厂家
编号：BTN17-0090
品牌：百奥莱博
规格：2000 U
英文名：HinfI Restriction Endonuclease
HinfI限制性内切酶识别位点：
5´...G↓A N T　C...3´
3´...C　T N A↑G...5´

产品组成：

 

成分	规格
HinfI，10U/μL	2000U
Buffer A，10×	1.0mL
Buffer B，10×	1.0mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存。

贮存Buffer：10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃)，100mM KCl，1mM DTT，1mM EDTA，0.2mg/mL BSA，50% glycerol。

1×Buffer A：10mM Tris-HCl(pH8.5)，10mM MgCl2，100mM KCl，0.1mg/mL BSA。

1×Buffer B：33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃)，10mM 醋酸*，66mM 醋酸*，0.1mg/ml BSA。

活性定义：一个活性单位是指50μL反应体系中，37℃条件下，1小时内将1μg的lambda DNA片段完全分解所需的酶量。

热灭活：65℃加热20分钟

使用方法：
1．单酶切DNA：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
nuclease-free water	16μL
10×Buffer A	2μL
DNA(0.5-1μg/μL)	1μL
HinfI	0.5-2μL

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2．双酶切或多酶切DNA：
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer)，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3．直接酶切PCR产品：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
PCR reaction mixture	10μL(约0.1～0.5μg DNA)
nuclease-free water	18μL
10×Buffer A	2μL
HinfI	1-2μL

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。

关于北京现货限制性内切酶HinfI厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
HC0138 程序降温盒
乳酚油                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                              100ml
PY08-040  胆盐乳糖培养基 10ml  10支/盒，用于药品大肠菌群、大肠杆菌和绿脓杆菌等的测定
ARB12451 大鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)Elisa分析 Rat leptospira igg,lep igG ELISA KIT
DP319 血液基因组提取试剂盒
ARB10320 人中期因子(MK)酶联免疫定量检测 Human midkine,mk ELISA KIT
90-05-1 α-甲氧基酚(愈创木酚)α-Methoxyphenol
M0113 ELISA液体广谱防腐剂                                         
BTN91204 动植物膜蛋白微量制备试剂盒 Animal-Plant Membrane Protein Miniprep Kit
51707-55-2 Thidiazuron (TDZ)  噻*隆
马脾铁蛋白 Sodium D-pantothenate 9007-73-2
F030217 HRP标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*HRP
Tris-HCl缓冲液(pH7.0)  1mol/L 100ml|500ml
ARB12752 小鼠c-jun Elisa方法检测 Mouse c-jun ELISA KIT
ARB12936 小鼠过敏毒素/补体片断4A(C4A)elisa检测 Mouse complement fragment 4a,c4a ELISA KIT
血液基因组DNA提取试剂盒(柱式法) 
茜素 PABA 72-48-0
ARB11294 人*腔蛋白(CALU)含量测试 Human calumenin,calu ELISA KIT
北京现货限制性内切酶HinfI厂家关键词：限制性内切酶HinfI,HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090

ARB12058 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)检测服务 Rat epithelial neutrophil activating Peptide 78,ena-78 ELISA KIT
甘*酸* Leucine Dehydrogenase 6000-44-8
BTN131019 无内毒素萤火虫荧光素 Endo-free Luciferin
半胱*酰甘*酸 Celite 545 19246-18-5
PY02-434  Swarm琼脂  250克  
002007 肝素*抗凝羊血
ARB13725 兔热休克蛋白20(HSP-20)elisa检测说明书 Rabbit heat shock protein 20,hsp-20 ELISA KIT
BL1427 50×TAE 缓冲液
ARB13838 猪一氧化*(代"氮")(NO)含量分析 Porcine nitric oxide,no ELISA KIT
ARB12404 大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)含量检测 Rat tissue factor pathway inhibitor,tfpi ELISA KIT
SJ0701 双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170kD)
Ammonium persulfate(APS)   1g
DP433 血液总RNA提取试剂盒
BTN131188 彩色Acryl DNA助沉剂 Color Acryl DNADOWN
Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH6.8)   100ml|500ml|2L
ARB13120 小鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)检测服务 Mouse leptospira igg,lep igG ELISA KIT
60-92-4 环磷酸腺苷 CAMP
593-84-0 Guanidine 　异硫*酸胍
ARB10525 人白细胞弹性蛋白酶(HLE)含量检测 Human leukocyte exastase,hle ELISA KIT
BL1062 乳糖胆盐培养基
碱性磷酸酶封闭液(乙酸法)   100ml
BL1197 结晶紫染色液(2.5%)
北京现货限制性内切酶HinfI厂家关键词：限制性内切酶HinfI,HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090


·HRP标记亲和素
编号：BTN131086
英文名称：HRP-Avidin
规格：2mg
本产品为辣根过氧化物酶标记的亲和素干粉，每摩尔亲和素含有1-2mol辣根过氧化物酶，结合能力为5-10μg生物素/mg蛋白≥80过氧化物酶单位/mg蛋白。本品常用在内源磷酸酶会对实验造成影响的免疫组化中使用以及免疫印记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·细胞计数液(Vi-CELL)
编号：BTN131200
英文名称：Cell Counting Reagent(Vi-CELL)
规格：100次
本产品为辣根过氧化物酶标记的亲和素干粉，每摩尔亲和素含有1-2mol辣根过氧化物酶，结合能力为5-10μg生物素/mg蛋白≥80过氧化物酶单位/mg蛋白。本品常用在内源磷酸酶会对实验造成影响的免疫组化中使用以及免疫印记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·低熔点琼脂糖
编号：BTN130835
英文名称：Low Melting Agarose
规格：5g
低熔点琼脂糖是指在糖链上引入羟乙基、甲氧基等基团后的琼脂糖，其能在30℃左右成胶，约65℃熔化，熔化温度低于大多数双链DNA熔点。利用低熔点琼脂糖的这种性质可以从凝胶中回收天然形式的DNA。本产品具有更高的筛过特性，更高的分辨率，更透明，是理想的DNA和RNA电泳产品。因其在37℃以下保持流动，亦适用于凝胶内进行的酶促反应、组织培养、细胞克隆以及病毒空斑实验。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
编号：BTN90604C
英文名称：PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。

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