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- 北京
- YT474-JMA
- 2025年07月15日
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- 英文名：
N-CFP plasmid（with CMV promoter）
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224
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北京百奥莱博科技有限公司
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名称：N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)厂商
产地：国产|进口
规格：1μg
编号：YT474
英文名：N-CFP plasmid（with CMV promoter）
品牌：百奥莱博
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含CFP(Cyan Fluorescent Protein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个CFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达量和细胞内定位，也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似，可以尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| CFP | 677-1393 |
| Multiple cloning site | 1394-1483 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
| SV40 polyA signal | 1536-1919 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
| bla promoter | 2388-2512 |
| SV40 promoter | 2532-2870 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
| pUC origin | 4284-4951 |
本质粒(5003bp)的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
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N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)厂商关键词：YT474,N端CFP标签融合蛋白质粒,N-CFP plasmid（with CMV promoter）,N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)
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文献和实验时效率最高 [2，3] 。在设计钙变色子时，用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团：蓝绿色荧光蛋白作为给体，而黄色荧光蛋白作为受体（见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴，分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用，而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质，分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念，钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的，前后融合的 CaM 的 N
. coli/mammals pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals 4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体（研究启动子专用）来自荧火虫的化学发光剂，加入底物后发光，不适合追踪单个细胞。 PGL3-basic PGL
检测、鉴定。 融合在N端的FLAG，其可以被肠激酶切除(DDDK)，从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。 MBP(麦芽糖结合蛋白) MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合
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