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        【资源】载体交换,欢迎站友交换

        丁香园论坛

        2244


        本人持有以下载体及基因:(原则上只交换不赠送,欢迎广大站友互通有无)

        QQ 2283524599 luckamily@126.com



        一、载体

        1)、miRNA载体

        Promega miRNA靶标克隆载体 psiCHECK-2 psiCHECK2 amp

        Ambion miRNA靶标克隆载体 pmiR-report pmiRreport amp

        Invitrogen miRNA过表达载体 PCDNA TM 6.2-GW/EmGFP-miR

        2)、哺乳动物/真核表达载体

        pcDNA3.1+ 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals

        pcDNA3.1- 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals

        pcDNA4/V5-His A, amp 含His标签的真核表达载体 amp/neo

        pcDNA 3.1(-) myc-hisA 含His标签的真核表达载体 amp/neo

        pcDNA 3.1(-) myc-hisB 含His标签的真核表达载体 amp/neo

        pcDNA 3.1(-) myc-hisC 含His标签的真核表达载体 amp/neo

        pcDNA4/HisB 含His标签的真核表达载体 amp/neo

        pcDNA3 flag 含flag标签的真核表达载体 amp/neo

        pIRES 一个真核双表达载体,外源序列只要是带有起始密码子和终止密码子就可以进行表达了,载体提供了转录装置PCMV和polyA。载体本身没有阅读框,只有转录起始位点,翻译的起始就由插入序列自己完成了。MCSB的共翻译是由IRES序列行使功能的,但要注意的是,这部分的翻译水平比较低,比前面的MCSA大概低一个数量级。所以要选择好两个蛋白的各自位置。

        3)、哺乳动物/真核荧光载体

        pEGFP-N1 pEGFPN1 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pEGFP-N3 pEGFPN3 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pEGFP-C1 pEGFPC1 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pEGFP-C2 pEGFPC2表达 绿色 荧光蛋白和目的shRNA的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pEGFP-C3 pEGFPC2表达 绿色 荧光蛋白和目的shRNA的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pSUPER-EGFP pSUPEREGFP表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pIRES2-EGFP pIRES2EGFP 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals

        pIRES2-ZsGreen1 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals

        pIRES-hrGFP-1a

        pDsred1-N1 pDsredN1 表达 红色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pDsred1-C1

        pDsred2-C1 pDsred2C1 表达 红色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pDsRed2-1

        pmCherry-C1 pmCherry-C1 表达 红色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals

        4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体(研究启动子专用)来自荧火虫的化学发光剂,加入底物后发光,不适合追踪单个细胞。

        PGL3-basic PGL3basic amp

        PGL3-control PGL3control amp

        PGL3-enhancer amp

        PGL3-promoter amp

        pRL-TK pRLTK amp

        pRL-CMV pRLCMV amp

        pRL-SV40 pRLSV40 amp

        pRL家族海肾荧光素酶(Rluc)对照报告基因载体系列是设计应用于双荧光素酶报告基因检测系统的。pRL载体提供组成性表达的海肾荧光素酶,可与一个萤火虫荧光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾荧光素酶的表达为使实验的萤火虫荧光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL载体包含一个编码海肾荧光素酶(Rluc)的cDNA, 这个cDNA从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis)中克隆而来。目前有四个不同的启动子载体。其中HSV-胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK)相对较弱, 在提供海肾荧光素酶报告基因载体的组成性表达时特别有用。早期SV40 增强子/启动子区域(pRL-SV40)和CMV极早期增强子/启动子区域(pRL-CMV)一般提供高水平转录,因此也许不适于应用在实验载体带有强调节因子的辅助报告基因实验中。一般, 我们建议在将要应用的目标细胞中验证一个特定辅助报告基因的性能。

        PGL4.29 amp

        PGL4.26 amp

        PGL4.51 amp

        PGL4.75 amp

        5)、原核表达载体(Novagen):

        pGEX4T-1 pGEX4T1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体

        pGEX4T-3 pGEX4T3 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体

        pGEX6P-1 pGEX6P1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体

        pET21b

        pETDuet-1

        pET26b

        pET42b

        PET11c amp

        PET15b amp

        PET17b amp

        PET22b amp

        PET24a kana

        PET28a kana

        pet30a

        PET32a kana

        PET39b kana

        PET42a kana

        PET302

        PET303

        6)、Clontech 酵母双杂交系统:

        pGBKT7-53 kana

        pGBKT7-lam kana

        pGADT7-T amp

        pCL1 control vector amp

        7):其它载体

        pLNCX2 amp Clontech逆病毒载体

        PVAX1载体 是目前做DNA疫苗最常用的载体之一,是美国FDA认可的应用于核酸疫苗的表达载体, 构建上没有什么特殊的要求,因为适合于DNA疫苗,所以便于短肽的表达,此载体在MCS中Xba I后已经加有终止密码子,所以可以不必在引物中加终止密码子. kozak序列可以增强基因的翻译而增强基因的表达, 没有它基因也能表达, 但是建议你在构建时在目的基因起始密码子ATG前加上这一个序列

        pVL1393, 昆虫表达载体

        pIEX/Bac-1 昆虫表达载体

        pTET on

        pTeT off

        pTER-tight

        pBAD HisA amp

        pBAD myc HisA amp

        pACYC184 amp

        pBluescript II SK (+) amp

        pIRESneo3

        pPICZ α B

        pVL1393,

        pIEX/Bac-1

        pcmv-myc

        P2GWF7

        pIS2 amp

        pFlag cmv1 amp

        pPICZ α B
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