热敏磷酸酶

热敏磷酸酶

规格：500U
产品简介:
本产品是从南极微生物中克隆并在大肠杆菌中表达的热敏磷酸酶,它能催化除去 DNA 或 RNA 末端的5′磷酸基团。由于磷酸酶处理后的 DNA 片段缺少连接酶所要求的5′磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
具体有下列特点:
1.除去 DNA、RNA、rNTPs和dNTPs 5" 末端的磷酸基团2.防止克隆载体的自连接
3.蛋白质丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的去磷酸化4.为 5" 末端标记准备模板
5.去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐6.65℃ 加热 5 分钟可使酶完全失活活性单位定义
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟能使1μg 经 HindIII (产生 5" 突出末端) 、EcoRV (产生平齐末端) 或 PstI (产生 5" 凹陷末端) 消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化 (通过转化 E.coli 细胞来检测)。
反应条件:
1X 热敏磷酸酶反应缓冲液 [50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2 (pH 6.0 @25℃)]。37℃ 温育。
热失活:
65℃ 5分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。