热敏磷酸酶(AP)

热敏磷酸酶(AP)

规格：5KU|1KU|500U
特性:
DNA 和 RNA 的去磷酸化
防止克隆载体的自连
制备 5´ 末端标记模板
去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
概述:
热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之前，可以不用去除热敏磷酸酶。
来源:
克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株，该基因最初克隆于质粒 pNI 中，后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。
反应条件:
1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl，1 mM MgCl2，0.1 mM ZnCl2（pH 6.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 5 分钟。
质保声明:
热敏磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟能使 1 μg 经 HindIII（产生 5´ 突出末端）、EcoRV（产生平齐末端）或 PstI（产生 5´ 凹陷末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 ＞ 95% 的 DNA 再环化（通过转化 E. coli 细胞来检测）。
浓度:
5,000 units/ml。