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- KALANG
- 中国大陆
- KL-D9200
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
500U
碱性磷酸酶,牛小肠
规格：500U英文名：Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
产品简介:
Calf Intestinal Alkaline Phosphatase(CIAP)牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的酶同样,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于 CIAP 处理后的 DNA 片段缺少连接酶所要求的5′磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA 的背景。本产品主要用于去除载体 DNA 片段的 5′-末端的磷酸基；防止克隆载体的自连接； 蛋白质丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的去磷酸化； 为 5" 末端标记准备模板。
活性单位定义:
在 37℃、pH9.8 的条件下,1 分钟内水解对硝基苯磷酸盐( p-nitrophenyl phosphate )生成 1 μ mol 的对硝基苯酚(p-nitrophenol)所需要的酶量定义为 1个活性单位(U)。
纯度:
1.30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.30 U的本酶和1μg 的Closed circular(RFI)pBR322 DNA 在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.18 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验1 溶解核酸酶P1（sigma)的冷冻干燥物与1.0ml30mM醋酸缓冲液（PH=5.3）？不知道此配法行不行？在sigma的说明书上没有具体说明！ 酶活性:1mg核酸酶P1在1小时，ph5.3 ,T=50 能够把2gRNA或0.2gDNA酶解为5-单核甘酸 促进此酶的稳定性：在孵育时，可加zn和人血清白蛋白增加其稳定性！ 2牛小肠碱性磷酸酶 试剂准备 • 10mM Tris-HCl (pH 8.0) • CIAP stop buffer 10mM Tris-HCl (pH
一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理； 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀，其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80，82％的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加，从而使溶质的溶解度降低
高。如果有相同的抗原决定簇时，则会有交叉反应。方法成熟，使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身，常采用的方法是：在一定条件下，使细胞中的酶作用于酶的底物，使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶（AKP）的显示方法最早由Gomeri（1939）提出，现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ，它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯，对于与磷酸相接的醇基没有特异性，Gomeri法
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