- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL81107
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
一年
- 英文名：
Maxi Column Endo-free Plasmid DNAOUT
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5次/10次
大提无内毒素质粒DNA提取试剂盒
英文名：Maxi Column Endo-free Plasmid DNAOUT规格：5次/10次
编号：KL81107
产品简介:
本产品是整合我公司经典法大提质粒DNAOUT(CAT#:80912)和菌体内毒素清除剂(CAT#:90901)两个产品而成。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。此产品的特点是:
1.独创的先去除菌体的内毒素再提质粒DNA策略,彻底避免了内毒素对DNA的污染。
2.去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.使用灵活,质粒大量提取和内毒素清除两个产品操作相互可以单独使用。
4.处理量大,一次可从50-100 mL过了夜培养的菌液纯化得到高达300-500 μ g的高拷贝质粒DNA(低拷贝质粒则产率降低)。
5.得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。
使用及效果:
按菌体内毒素清除剂使用手册处理细菌(详见菌体内毒素清除剂使用手册),再用去除内毒素后的细菌提取质粒DNA
运输及保存:
常温,有效期一年(其中的RNase A溶液需要4℃保存)。
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文献和实验只适合酶切测序等。而我用无内毒素大提试剂盒时，就没出现这种情况，溶度有1000多微克每毫升。所以，建议：1.要转染最好就用无内毒素大提试剂盒2.已小提，想纯化滤菌用于转染建议参考“将质粒溶液进行浓缩，每50微升质粒溶液加2微升5mol/L NaC1混匀，冷的无水乙醇沉淀质粒，10 000r/min离心5min，弃去上清，用70% 的乙醇洗1次，无菌条件下真空干燥，以灭菌生理盐水溶解质粒至质量浓度为1 微g/微L，一20度保存。质粒转染前，行酶切及测序鉴定。”
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
来看一下。提交订单，等待引物到达：华大基因的速度非常快，大约在 2 - 3 个工作日即可拿到，在等待期间需要准备好：LB + 抗生素抗性平板；感受态细胞及相应培养基；无内毒素的 Cas9 载体质粒；BbsI 限制性内切酶；质粒小提试剂盒；常规限制性内切酶。
1. 质粒载体构建不成功（目的片段和载体不能成功连接）的常见原因分析 ①DNA 片段纯度差：体系中的杂质会降低连接效率，如果使用不纯化直接连接的方法一直无法成功构建载体，可以考虑进行纯化后再进行连接； ②目的片段和载体片段使用比例悬殊，或者用量过多或过少：目的片段和载体的摩尔比需要控制在一定范围之内，否则会影响连接效率，具体比例可以草靠连接酶说明书； ③连接条件不当：比如连接时间不足、温度不合适、酶失活等，可以通过设置对照组来排查原因； ④引物设计问题：比如通过无缝克隆的方式进行连接，同源
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