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6个月
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- 库存:
1000
- 供应商:
合肥博美
- 规格:
1ml/2ml/10ml/15ml
| 规格: | 1ml | 产品价格: | ¥32.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2ml | 产品价格: | ¥52.0 |
| 规格: | 10ml | 产品价格: | ¥120.0 |
| 规格: | 15ml | 产品价格: | ¥152.0 |
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文献和实验2~4 h,使抗体与 protein A 琼脂糖珠偶连; 免疫沉淀反应后,在 4 ℃ 以 3 000 rpm 速度离心 3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3~4 次;最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液,沸水煮 5 分钟; SDS-PAGE,Western blotting 或质谱仪分析。 四、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜
电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
1、试剂耗材的准备:(1)转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl,39 mM 甘氨酸,0.037% SDS,20%甲醇):(2)10 × 丽春红染液:(3)TBS 缓冲液:(4)TBST 缓冲液(含20%Tween20 的TBS 缓冲液):(5)封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液):(6)一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或TBST 进行稀释。(7)底物显色液ECL,4℃ 避光保存,现用现配。(8)显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中,可多次使用。室温避光存放
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