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-20/-80
- 保质期:
6个月
- 英文名:
shRNA lentivirus
- 供应商:
吉玛生物
- 规格:
10^8 TU/ml*4
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
对于活体 RNAi实验模型,吉玛公司可以为您生产高质量的病毒液,服务流程如下:
根据目的基因相关信息(序列,序列号等),利用高效的设计软件,设计 shRNA序列,针对每条目的
基因,我们设计3条shRNA序列,其中1条序列为阴性对照组,在侵染效率达到80%以上时,保证mRNA水平有70%的干扰效果,如果无效,免费重合一次;
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根据设计好的 shRNA序列,设计,合成两条互补的短片段的DNA;
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对合成好的 DNA片段进行稀释,退火,连接到线形化处理过的载体,转化,涂平板,过夜培养;
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通过 PCR的方法筛选阳性菌落,进行测序,分析测序结果;
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对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量的不含内毒素的 shRNA病毒穿梭质粒;
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筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞,进行病毒包装和生产,收集病毒液;
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浓缩、纯化病毒液,测定滴度;
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提供高质量的病毒液给客户(对于活体实验,我们建议的病毒基本单位为 1×109TU/ml ,对于小鼠尾静脉给药建议50~100ul/只)
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新学期伊始, 吉玛公司隆重推出 慢病毒干扰套餐 系列产品:
慢病毒干扰超值A套餐,价格9800元(设计4个干扰靶点,每个包装10 8 TU/ml病毒1ml,对照赠送1ml)
慢病毒干扰超值B套餐,价格13000元(设计4个干扰靶点,每个包装10 9 TU/ml病毒1ml,对照赠送1ml)
慢病毒干扰经济C套餐,价格8880元(设计3个干扰靶点,每个包装10 8 TU/ml病毒1ml,对照赠送0.6ml)套餐C促销价格是7880元。
慢病毒干扰经济D套餐,价格11880元(设计3个干扰靶点,每个包装10 9 TU/ml病毒1ml,对照赠送0.6ml)套餐D促销价格是10880元。
套餐内3-4个靶点保证1个有效(mRNA水平70%左右干扰效果),如无效,可以选择退款或者作预付款或者免费重新设计靶点再包装1次 
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文献和实验hawk2003 RNA干扰:shRNA脂质体转染HuT102细胞,转染率特别低,低于10%,请问各位大侠有什么好的建议?有人推荐电转,对电转不太了解,也不知道哪实验室能做电转,请大家给个建议!谢谢!用慢病毒转染效果怎么样? zhujoker 推荐使用慢病毒干扰,不仅效果好,而且现在的认可度高。 baby_susan 转染条件摸索过吗,转染试剂可以选择更换一下看看,实在不行要么直接用化学
(1)原理 慢病毒是逆转录病毒的一种,具有逆转录病毒的基本结构,但也有不同于逆转录病毒的组份和特性,作为基因治疗载体发展起来,最近已用于转基因动物制备。利用慢病毒构建的shRNA/miRNA载体,与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的shRNA相比。一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,lentivirus-shRNA/miRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受
了恶性表型。 代谢组学、蛋白质组学以及 ECAR 和 OCR 测试揭示了 ADPGK 显著加速了 PCa 的糖酵解。 ADPGK 与丙酮酸激酶 C(ALDOC)结合,通过 AMP 激活蛋白激酶(AMPK)磷酸化促进糖酵解。 图 2 用于 ADPGK 过表达的慢病毒结构示意图及 ADPGK 过表达结果。 案例 2:用慢病毒载体递送 RNA 干扰工具,研究脯氨酸羟化酶结构域蛋白在调节心肌细胞钙水平中的功能[2] 由于高氧消耗,心肌细胞对环境中的氧气极为敏感。脯氨酸羟化酶结构域蛋白 2(PHD
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