慢病毒专用转染试剂LentiFit™

产品简介：

LentiFit^TM脂质体转染试剂是一种高效的阳离子脂质体转染试剂。与其他脂质体转染试剂相比，汉恒生物独立研发的 LentiFit^TM脂质体转染试剂具有转染效率高，重复性好，操作简单，无明显细胞毒性，抗血清干扰等优点。对于大多数细胞，用LentiFit^TM转染后72小时内不更换培养液无明显细胞毒性。同时，血清的存在不影响LentiFit^TM的转染效率，这样可以减小无血清对细胞的损伤。基于以上优点，LentiFit^TM常用做慢病毒包装的转染试剂。

包装清单以及储存条件：

试剂名	货号	储存条件	规格	有效期
LentiFitTM转染试剂	Let1000	4℃保存	1 mL	12个月

使用方法：
1. 细胞培养：以1个10 cm培养皿转染293T细胞为例，转染前一天接种细胞(20-24小时)，接种细胞约3.5×10⁶ ，接种体积10 mL，确保第二天转染时细胞汇合度（confluent）能达到约50%~70%。
2. 在进行转染步骤前，把10 cm培养皿中的培养液更换成新鲜细胞培养液，培养液的体积为5 mL，放回培养箱中继续培养，并准备转染体系（步骤3-6）。
3. 把LentiFit^TM脂质体转染试剂轻轻混匀。
4. 对于待转染的10 cm培养皿中的细胞，取一只洁净无菌离心管，加入24 µg质粒（目的质粒和辅助质粒的比例根据不同包装系统进行调整）到500 µL DMEM溶液，用枪轻轻吹打混匀。
5. 取另一只洁净无菌离心管，加入500 µL DMEM溶液，再加入40 µL LentiFit^TM，用枪轻轻吹打混匀,室温放置5分钟。
6. 将步骤4与5中的质粒溶液与LentiFit^TM溶液混合，用枪轻轻吹打混匀。不可Vortex或离心。室温孵育20分钟。有可能出现絮状沉淀物，属正常现象，不会影响转染效率。
7. 将转染复合物逐滴加入到培养皿中，轻轻“8”字形摇晃混匀后，放回培养箱继续培养。
8. 培养6-12小时后，更换为完全培养基，继续培养。

注意事项：
1. 使用高纯度的DNA（A260/A280比值越近1.8越好）有助于获得较高的转染效率。对于质粒，推荐使用Qiagen公司生产的质粒大量抽提试剂盒进行高质量无内毒素抽提。
2. 细胞状态会极大影响转染效率，所以转染前细胞必须处于良好的生长状态。
3. 需自备DMEM培养基，其他培养基如1640、MEM、alpha-MEM，F12，DMEM/F12、M199也均可以用于转染实验。
4. LentiFit^TM不能vortex或离心，宜缓慢晃动混匀。
5. LentiFit^TM使用后请立即盖好盖子，避免长时间暴露在空气中，影响转染效率。
6. 经测试，LentiFit^TM细胞毒性不明显，非常适用于慢病毒包装；请在进行病毒包装时严格按照病毒安全操作进行。
7. 为了您的安全和健康，请在符合洁净度要求的细胞培养室中进行转染操作，操作时请穿实验服并戴一次性手套、口罩和无菌帽。

正装规格及价格：

规格          价格 1ml           1080 2ml           1680 3ml           2380 5ml           3480 10ml         7880

 注：无特殊情况申请后7个工作日内发货