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TOYOPEARL®,多孔、半坚硬凝胶树脂系列,一般用做中压液相色谱填料,能在高流速下正常工作,最适应于制备分离及放大至工业纯化生产中,目前已广泛应用在生物高聚物和生物化学产品分离纯化领域。
HW型尺寸排除凝胶树脂
HW 树脂是由乙烯醇和甲基丙烯酸酯共聚而成的半坚硬球状体。树脂表面有许多羟基和醚键,羟基基团形成了许多官能团吸附点使之具有亲水性。它是一种大孔分子尺寸排除树脂,对蛋白质分离和未知生物分子的分子量估算非常有效。HW凝胶树脂克服了普通凝胶存在的不能适应高流速、高压,特别是不能适应极端的PH和盐溶液、有机溶剂等缺点。HW分为五种系列 HW-40、HW-50、HW-55、HW-65、HW-75。其中HW-65是Toyopearl 离子交换、疏水反应、亲合树脂的基体。
HW树脂的优点:
· 由于颗粒尺寸分布窄,因此具有高分辨率、锐谱峰的特点,能适应低浓度样品分离。
· 改善了多糖和糖蛋白的分离纯化
· 保证了蛋白质活性和质量高回收率
· 物理化学性质稳定
· 可以按比例放大到生产规模,重现性好
HW-65性能
| Toyopearl
树脂型号
|
颗粒尺寸(μm)
|
孔尺寸 Å
|
被分离的球蛋白分子量范围
|
| HW-65S
|
20-40
|
1000
|
4万-500万
|
| HW-65F
|
30-60
|
1000
|
4万-500万
|
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文献和实验,不能耐受压力。 薄壳型离子交换树脂:在玻璃微球上涂以薄层的离子交换树脂,这种树脂柱效高,当流动相成分发生变化时,不会膨胀或压缩;缺点是但柱子容量小,进样量不宜太多。 ③离子交换色谱法的应用 主要用来分离离子或可离解的化合物,凡是在流动相中能够电离的物质都可以用离子交换色谱法进行分离。 广泛地应用于:无机离子、有机化合物和生物物质(如氨基酸、核酸、蛋白质等)的分离。 4.凝肤色谱法(空间排阻色谱法) 凝胶是一种多孔性的高分子聚合体,表面布满孔隙,能被流动相浸润,吸附性很小。凝胶
,积累凝胶至大约300μl。3) 在装有凝胶的离心管中加入1mL树脂, 65℃水浴5min或直到凝胶完全溶解。4) 拔出注射器活塞备用,将 Syringe Barrel和Minicolumn 连接。5) 将树脂DNA混合液移入Syringe Barrel中,插入活塞缓慢将混合液推入Minicolumn。6) 分开syringe Barrel和Minicolumn ,去掉活塞。重新连接Syrringe Barrel和Minicolumn, 加入2mL 80%异丙醇到Syringe中以洗柱子。插入活塞
的离心管中加入1mL树脂, 65℃水浴5min或直到凝胶完全溶解。 4) 拔出注射器活塞备用,将 Syringe Barrel和Minicolumn 连接。 5) 将树脂DNA混合液移入Syringe Barrel中,插入活塞缓慢将混合液推入Minicolumn。 6) 分开syringe Barrel和Minicolumn ,去掉活塞。重新连接Syrringe Barrel和Minicolumn, 加入2mL 80%异丙醇到Syringe中以洗柱子。插入活塞
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