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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时,如何进行流式凋亡分析?
随着生物研究进入基因时代,转染技术的应用越来越广泛。在此过程中,通常会引入 GFP(绿色荧光蛋白)标签,去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中,我们曾多次提到过流式配色问题。今天,就来带大家看看,带有 GFP 标签的细胞,在流式凋亡检测中,应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时,需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510,通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此,我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒,如 AF488
,分别检查各项单色补偿值,并更改增益值。3. 获取单色补偿值(采用 VersaComp 微球,产品目录号:B22804)。4. 创建新实验。5. 导入先前针对 BV421、BV510、BV605、BV650、FITC、PE、PE-Cy7、APC、AF700 以及 APCAF750 创建的补偿设定值。6. 创建以下图区:CD45-SSC,圈选 CD45+ 细胞;FSC-SSC,圈选淋巴细胞;FSC-A-FSC-W,圈选单细胞;被排除细胞与 CD7,圈选 exclusion -/CD7+ 细胞;CD
聚焦大战中的前头兵,但因为售价高,而且性能并不比α7000优越,在市场上处于极为不利的地位,几乎是一败涂地,对于在日本连年占销量第一的佳能来说,无疑是一场灾难。因此,佳能决心化悲痛为力量,暗中秣马厉兵,它要确信能设计出一架将美能达α7000打倒的AF单反机,才会出击。 佳能做到了!在沉默了两年后,于1987年3月,佳能推出了其第一架镜头一体化AF单反机EOS 650。佳能与其他公司的做法不同,它是将AF驱动马达装在镜头内,而不是像其他公司那样装在机身内。佳能对于设计这类
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