企业认证
-20℃低温保存
三年
lenti dCAS-VP64_Blast
20
泽叶生物
| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | lenti dCAS-VP64_Blast |
| 质粒类型: | CRISPR/Cas9载体；基因敲除载体;哺乳动物载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 克隆方法: | BsiWI，EcoRI |
| 启动子: | EF1 |
| 载体大小: | 14085 bp |
| 5' 测序引物及序列: | GTTTGGATCTTGGTTCATTCTCAAGCCTCAG |
| 3' 测序引物及序列: | cacatagcgtaaaaggagcaacatag |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素(Ampicilin) |
| 筛选标记: | Blasticidin |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 宿主细胞（系）: | 哺乳动物细胞 |
| 备注: | Mutation D10A and N863A in Cas9 |
| 产品目录号: | ZY61425 |
| 稳定性: | 稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 慢病毒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Lenti-Virus Protocol 张端午 A. For packing virus in 6-well plate: (if in 12-well plate, reduce all to 1/2) 1. Mix the following plasmids in a 1.5 ml eppendorf tube, 1.5 μg Lenti-vector + 1.5 μg packing plasmids = 3 μg total 0.5:0.3:0.2
性激活/抑制：通过人为突变Cas9的RuvC1、HNH两个剪切位点，Cas9蛋白的切割能力损失变成dCas9蛋白，dCas9和sgRNA复合物可以在DNA的特定位置结合在DNA上，在此基础上，研究人员在复合物的后方连接一些转录调控元件，如转录激活的VP64、VP16等，转录抑制的KRAB等，同时将复合物锚定在基因转录起始区域的上游，即可实现对特定基因的转录激活或转录抑制。dCas9技术原理3.外源过表达和内源激活的区别和选择4.基因干扰和基因敲除的的区别和选择
效率，比如电转化比化学转化的效率更高。 3. 如何设计目的片段引物？ PCR 引物设计，是决定实验是否成功的重要一环，现有的 PCR 设计工具，比如Primer-BLAST (NCBI)、Primer Designer Tool (Thermo Fisher)、 Primer3 等都可以针对目标序列设计出相应的引物，可以根据目标序列特征、实验室资源来选择合适的引物设计工具。如果后续通过无缝克隆的方法构建载体，在设计 PCR 引物时，还需要将同源臂序列添加到上下游引物的两端。具体添加方法可参考所用的同源
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
