- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY8062
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
lenti dCAS-VP64_Blast
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
基本信息
| 质粒类型: | 慢病毒表达载体,CRISPR/Cas系统 |
|---|---|
| 启动子: | EF1a |
| 载体大小: | 14085 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 筛选标记: | Blasticidin |
| 备注: | 3rd generation lenti vector encoding dCAS9-VP64 with 2A Blast resistance marker (EF1a-NLS-dCas9(N863)-VP64-2A-Blast-WPRE) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY8062 | lenti dCAS-VP64_Blast | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验Lenti-Virus Protocol 张端午 A. For packing virus in 6-well plate: (if in 12-well plate, reduce all to 1/2) 1. Mix the following plasmids in a 1.5 ml eppendorf tube, 1.5 μg Lenti-vector + 1.5 μg packing plasmids = 3 μg total 0.5:0.3:0.2
性激活/抑制：通过人为突变Cas9的RuvC1、HNH两个剪切位点，Cas9蛋白的切割能力损失变成dCas9蛋白，dCas9和sgRNA复合物可以在DNA的特定位置结合在DNA上，在此基础上，研究人员在复合物的后方连接一些转录调控元件，如转录激活的VP64、VP16等，转录抑制的KRAB等，同时将复合物锚定在基因转录起始区域的上游，即可实现对特定基因的转录激活或转录抑制。dCas9技术原理3.外源过表达和内源激活的区别和选择4.基因干扰和基因敲除的的区别和选择
基因”)。 『Cas9 细胞系的构建』 dCas9-VP64 融合蛋白，需要细胞系预表达。该文献案例中，作者将 CRUK0748-XCL 细胞系改造为 CRUK0748-XCL-GLD 细胞，使其表达催化失活的 dCas9 与 VP64 融合的蛋白 (用于激活基因转录) 、GFP 和荧光素酶 (用于体内追踪)。 简单来说：使用了一种“没有剪切活性”的突变 Cas9 蛋白 (称为 dCas9) 。在 dCas9 上连了一些“转录激活因子” (如 VP64、p65、HSF1) 。当它被向导 RNA (sgRNA
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