- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY2038
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pENTR4-FLAG
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | Gateway载体 |
|---|---|
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 2333bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | ENTR-F: CTACAAACTCTTCCTGTTAGTTAG |
| 3' 测序引物及序列: | ENTR-R: ATGGCTCATAACACCCCTTG |
| 载体标签: | N-FLAG |
| 载体抗性: | Kanamycin (卡那霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY2038 | pENTR4-FLAG | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验TOPO克隆提供高效的一步法克隆策略，可以定向克隆平端PCR产物到入门载体。平端PCR产物定向克隆的效率>90%，从而简化了筛选。同时不再需要连接酶、PCR后续步骤或者限制性内切酶。目前有两种定向TOPO克隆载体。pENTR/D-TOPO 和pENTR/SD/ D-TOPO（表2和图3）有以下特点： 位于PCR产物插入位点两侧的attL重组位点可以与Gateway目的载体进行有效重组 通用M13位点便于测序 基于pUC的ori位点提供高产量质粒 大肠杆菌中卡那霉素（kanamycin
liuruya 问别人要了个带GFP-tag（GFP-N2载体）的质粒，目的基因1.4kb，分子量约52kD，转染293T细胞能见荧光，WB杂不出来，设置了阴性和阳性对照证实不是WB的技术问题。后来又换了个flag-tag，仍然杂不出来WB。仔细检查过序列，不存在移码的问题，非常费解。有同学分析是空间位阻问题，不知换个tag是不是能解决这个问题。有同学遇到过这种问题么，或者帮忙分析一下可能的原因。谢谢！！！ zhuqueleee
GFP应该位于VEGF的C端 N端会干扰其分泌信号 影响其分泌 GFP很大 很可能影响VEGF的分泌 如果只是要筛带荧光的细胞 不需要标记VEGF 建议用pIRES2-EGFP非融合载体 要是需要标记的话 可以加小分子tag 比如flag 实在需要荧光标记VEGF的话 把GFP加在C端 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿
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