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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pBV221
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1884 | pBV221 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
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文献和实验温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子,具有极强的起始RNA转录的功能,基因工程中常用它来构建高效表达载体,它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts),由DNA片段CIts857(857bp长)编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性,在42℃时失活而失去抑制启动子的活性,因此,改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达,这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又可以进一步做成T载体,再把基因克进去,如此反复... 关键是T载体要制备的好,筛选的时候多挑几个克隆,如果需要定向克隆基因的话可利用载体上的引物筛选之,然后利用基因内部合适的酶切位点来验证... 欢迎交流! qianjing930 我做过三段重复片段的串联,用的是pBV220载体. 第一对引物为EcoRI_KpnI_____BamHI;第一段单体插入pBV220载体中的EcoRI
表达效率往往更高。 将IL基因以5’端 Eco RI和3’端 Bam HI酶切位点插入pBV220载体多克隆位点中,转化到大肠杆菌JMl03内,便能通过温度的变换控制CI蛋白的活性,继而调节启动子的活性,使IL基因连同其5’端上游带SD序列转录成mRNA并转录终止于rrnB位点,SD序列与ATG的间距为6bp,mRNA作为模板使核糖体高效翻译出IL产物。 实验材料和试剂 (一)实验材料
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