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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pX320
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | CRISPR/Cas系统 |
|---|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY2091 | pX320 | 5ug质粒 |
¥1800.00 |
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
2 Cas9 - 2 hitKO 系统三、Cas9 - 2 hitKO 系统中涉及到的载体为了达到高效的敲除效率,我们在同一个载体重引入 cas9 酶和两个向导性 RNA。整个系统包括 3 个载体: PX458M ,PX459M 和 EZ-GuideXH。PX458M ,PX459M 除了含有 Cas9 和一个向导性 RNA 插入位点,还引入第二个向导性 RNA 插入位点。EZ-GuideXH 是为插入第二个向导性 RNA 的辅助性载体。PX458M 带有 EGFP 荧光标记; PX459M 带有
最有效的siRNA序列。3.阴性对照一个完整的siRNA实验应该有阴性对照,作为阴性对照的siRNA应该和选中的siRNA序列有相同的组成,但是和mRNA没有明显的同源性。通常的做法是将选中的siRNA序列打乱,同样要检查结果以保证它和目的靶细胞中其他基因没有同源性。(二)siRNA的制备目前为止较为常用的方法有通过化学合成,体外转录,长片断dsRNAs经RNase III 类降解 (e.g. Dicer, E. coli, RNase III)体外制备siRNA,以及通过siRNA表达载体或者病毒载体
奥秘的进程.现在越来越多的研究人员开始采用RNAi 来研究生物体的基因表达.RNAi技术可广泛应用到包括功能基因组学,药物靶点筛选,细胞信号传导通路分析,疾病治疗等等.目前为止较为常用的5种制备siRNAs的方法包括:·化学合成·体外转录·长片断dsRNAs经RNase III 类降解 (e.g. Dicer, E. coli, RNase III)·siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAs·PCR制备的siRNA表达框在细胞中表达获得高纯度的siRNA产物是进行实验的第一步,而转染
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