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- Southern印迹杂交实验服务
- 2026年02月08日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
Southern印迹杂交实验服务
- 提供商：
晶莱生物
- 规格：
实验服务
实验流程
Southern杂交检测样本收集注意事项：
1.新鲜组织：
用解剖刀等迅速切成小碎块，约30-100 mg，放入2.0 mL离心管中，开盖液氮速冻15 min，-80℃保存，干冰运输。
每个southern blot泳道提供2-3管样品。
注：(1)解剖刀处理组织的时间尽量控制在1 min以内。
(2)液氮速冻时必须开盖，以防炸裂。
(3)对于较难提取的植物组织，如苎麻、榨菜、枣子、鱼、甘蔗、大薯等，1-2g样品用铝箔纸包好，液氮速冻15 min，-80℃保存，干冰运输。
2.细胞样品：
悬浮细胞1000-1500 rpm，5 min，常温离心收集细胞。贴壁细胞用胰蛋白酶消化后，吹打收集，PBS洗涤细胞，去除多余培养基和胰蛋白酶。开盖液氮速冻15 min，-80℃保存，干冰运输。
一般情况下，细胞培养的6孔板，每孔细胞数量约为0.5~2×106个。每个离心管中的细胞数量控制在5×106个左右！每个southern blot泳道提供2-3管样品。
3.DNA样品（双蒸水水溶解）：
2-8℃短期保存，-20℃长期保存；加冰块低温运输。
质量检测：取1-2μL的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，无蛋白质和RNA等物质污染，无降解弥散，条带清晰。
纯度、浓度检测：OD260/280=1.8~2.0，OD260/280＞2.0；浓度≥100 ng/μL。
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文献和实验相关专题 本文主要介绍了利用Southern印迹杂交技术来获得DNA分子中基因编码区的大小和位置的实验原理、方法步骤。主要分成待测核酸样品的制备和 琼脂 糖凝胶电泳分离待测DNA样品两部分。 Southern印迹杂交仪器 实验原理 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成
，所以最为常用。常用的固相杂交类型有：菌落原位杂交、斑点杂交、狭缝杂交、Southern 印迹杂交、Northern 印迹杂交、组织原位杂交和夹心杂交等。固相膜核酸分子杂交1. 菌落原位杂交（Colony in situ hybridization）将细菌从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上，然后将滤膜上的菌落裂菌以释出 DNA，再烘干固定 DNA 于膜上，与 32P 标记的探针杂交，放射自显影检测菌落杂交信号，并与平板上的菌落对位。2. 斑点杂交（Dot blotting）该方法是将被检标本点到膜上，烘烤
【交流】DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论
Southern印迹杂交（Southern blot）是1975年由英国人southern创建，是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。 早期的Southern印迹是将凝胶中的DNA变性后，经毛细管的虹吸作用，转移到硝酸纤维膜上。印迹方法如电转法、真空转移法；滤膜发展了尼龙膜、化学活化膜（如APT、ABM纤维素膜）等。利用Southern印迹法可进行克隆基因的酶切、图谱分析、基因组中某一基因的定性及定量分析、基因突变分析及限制性片断长度多态
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