
Southern Blot
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- 2025年07月16日
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Southern Blot技术简介:
Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
实验原理图或流程图:
技术服务流程:
Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
实验原理图或流程图:
技术服务流程:
①制备待测核酸样品;
②琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品;
③凝胶预处理后转膜;
④探针标记, Southern杂交反应;
⑤显影检测
客户提供:
客户提供:
①目的基因信息及待测样本量信息;
②样本送样要求:
•组织:每个样本总量不小于100mg,干冰运输;
•细胞:新鲜细胞,灌满培养基运输,或细胞冻存管,干冰运输;
•DNA:要求OD260/OD280=1.8-2.0,基因组DNA要求总量>10ug,浓度>200ng/ul;DNA完整性好,无降解;
•若客户已制备好探针可以提供
实验结果交付:
实验结果交付:
①原始Southern Blot 实验结果胶片图;
②详细实验报告,含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。
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文献和实验相关实验
for 2 hours. Blot can be stored under vacuum wrapped in foil.
SOUTHERN BLOT 1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs. 2. Photograph the gel with a ruler adjacent to the molecular weight markers as a reference. 3. Alkali transfer buffer
This is a brief overview of how a Southern blot (more formally called an DNA blot)is performed and what type of data you can obtain form one. Figure 1.Southern blots allow investigators to determine the molecular weight
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