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- 2025年07月16日
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凝胶阻滞或电泳迁移率实验（EMSA），是一种用于研究蛋白与核酸相互作用的技术，主要包括转录因子与启动子互作的验证性实验，蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究等方面内容，可用于定性和定量分析。
实验原理图或流程图：
技术服务流程：
①细胞样本：需提供至少1*10^7细胞量；
②新鲜组织样本：大于500mg/样本,干冰运输；
③目的基因信息、蛋白信息及待测样本物种信息；
④提供转录因子特异性抗体
实验结果交付：
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文献和实验改善EMSA的电泳结果。如需纯化，可以按照如 下步骤操作：（1） 对于100微升标记好的探针，加入1/4体积即25微升的5M醋酸铵，再加入2体积即200微升的无水乙醇，混匀。（2） 在-70℃至-80℃沉淀1小时，或在-20℃沉淀过夜。（3） 在4℃，12, 000g-16, 000g离心30分钟。小心去除上清，切不可触及沉。（4） 在4℃，12, 000g-16, 000g离心1分钟。小心吸去残余液体。微晾干沉淀，但不宜过分干燥。（5） 加入100微升TE，完全溶解沉淀。标记好的探针最好立即使用
液:2μl; ②稳定液D:1μl; ③探针:1μl; ④去离子水:4μl 。D 、将探针棍合物加入预孵育好的核提取物混合物中，用移液器轻轻吸打混匀后，4 ℃ 继续孵育20 分钟。E、EMSA 测定: 预先将5% 非变性丙烯酞胺胶(38:2 ) 和电泳缓冲液(1X TGE) 预冷至4 ℃ , 然后: ①将每反应管内所有反应物加入样品孔中。同时在一空白孔中加入含溟酚蓝的上样缓冲液，以观测胶的移动情况。当溟酚蓝电泳至玻璃板下1/3 即可停止电泳( 约2 小时) 。②电泳:12.5V/cm(16cm 玻璃
luozhifeng339 请教各位达达，我准备做EMSA，如果做SUPER-SHIFT的话，该选择原装抗体还是分装的抗体呢，盼不吝赐教！ wanglinling 看到一篇EMSA的文章，不知道里面有没有回答你的问题哈，不过英文的值得阅读哈。 GEL SUPER-SHIFT ASSAY/ EMSA Materials/Reagents: See Gel-shift assay Procedure
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