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- 捷世康
- 山东省青岛市城阳区韩海路青大工业园
- JR558
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20度
- 库存：
900
- 供应商：
青岛捷世康
- 规格：
48T/96T
| 货号 | 名称 | 克隆菌株 | 抗性 | 储存 |
| JR558 | pLVX-shRNA2-Puro | Stbl3 | Amp 100 μg/ml | -20℃ |
操 作 说 明
|
试剂类：SIGMA、AMERSCO、TCI、TRC、美国中草药
血 清：GIBCO、HYCLONE、四季青、MRC
抗 体：ABCAM、SANTA、CST、BD、华美、RD
标准品：DR、USP、EP 、法国中草药、美国中草药、Accustandard
三、合作单位：
销往全国北京上海武汉等地，批发零售均可，质量保证价格优惠、实验效果好,提供全程技术服务或免费代测服务（山东省内可上门取样）产品具有灵敏度高，快速,准确,操作简单,易于保存等优点。欢迎来电咨询订购。
；中国农业大学、青岛大学、福建茶叶研究所、北京大学、南京农业大学、广州医学院、复旦大学、浙江大学、浙江理工大学等单位。
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文献和实验一、导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤: 细菌培养物的生长。 细菌的收获和裂解 质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数，惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长到对数晚期，就可以大量提纯质粒。 此时，不必造反性地扩增质粒DNA。然而，较长一代的载体(如pBR
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
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