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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干燥密封保存
- 库存:
现货
- 供应商:
赫澎(上海)生物
- 规格:
20次
产品内容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO缓冲液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO底物液(Reagent D) 微升
HEPENGBIO标准液(Reagent E) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO清理液(Reagent A)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;HEPENGBIO底物液(Reagent D)和HEPENGBIO标准液(Reagent E)避免光照和反复冻融;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
细胞刮脱棒:用于脱离贴壁细胞
微型台式离心机:用于样品沉淀
培养箱:用于反应物孵育
96孔板或比色皿:用于样品荧光测定的容器
荧光酶标仪或荧光分光光度仪:用于样品荧光分析
实验步骤
- 样品制备
-
- 准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5 X 106细胞)
- 小心加入xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent A),覆盖生长表面
- 小心抽去清理液
- 使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:可以使用胰酶消化)
- 加入xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent A),混匀细胞
- 移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)
- 放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g
- 小心抽去上清液
- 加入xx微升HEPENGBIO裂解液(Reagent B),充分混匀
- 转移到预冷的1.5毫升离心管
- 强力涡旋震荡15秒
- 置于冰槽里孵育30分钟
- 放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管
- 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用HEPENGBIO Bradford蛋白质浓度定量试剂盒)
- 即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作
- 测定准备
- 准备好待测样品(例如细胞裂解萃取液样品等),置于冰槽里
- 设定好荧光分光光度仪(温度为37℃):激发波长360nm,散发波长460nm,并置零
- 准备好5个1.5
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