• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        测定NF-κB 活性

        互联网

        8960

        【求助】测定NF-κB 活性

        参与者:sandy99

        实验中设计测定NF-κB 活性,我查的资料有以下几种选择:

        1、EMSA。请教所设计的标记探针的序列?以及该实验的注意事项。(没做过)

        2、抽提核蛋白,用P65抗体做Western Blot.

        请问性价比较高的,好做的是哪个公司的抗体?还有啊,如果这个抗体用FITC标记过,是不是就可以用来做激光共聚焦实验?也可做WB?

        3、ELISA,贵,暂不考虑。

        谢谢!

        参与者:hwclove

        我试着说一下我的看法:

        1.EMSA中一般都是用P标记的探针,具有放射性,要是用生物素标记的话,放射性就小了,但是花的钱就多了。这个实验要是样本不多的话,大约花费4000左右吧,最重要的是放射性的问题,必须有磷屏,否则没法做。

        2.首先说应该用磷酸化的P65抗体,一般都用santa cruz公司的。这个北京中杉代理,并且有分装的,420块钱100μl,你要是做得少的话可以选择分装的抗体。

        3.还有就是免疫组化也是可以的。还有一种更好的方法就是promega的双荧光素酶报告系统,采用海肾和萤火虫两种荧光素酶,一种报告目的基因,一种报告内参,很好的方法,但是很贵。

        总体来说,做EMSA和双荧光素酶是最好的方法,算是定量,但是EMSA有放射性,双荧光素酶比较贵。western和免疫组化只能用来半定量,但是做的人比较多,也能发高水平的杂志,相对来说比较简单,也省钱。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序