- ￥6000
- 赫澎生物
- 上海
- HPBIO-JM1450-
- 2025年11月27日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
干燥密封保存
- 库存：
现货
- 供应商：
赫澎（上海）生物
- 规格：
20次
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO裂解液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO反应液（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO饱和液（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO阴性液（Reagent E） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；HEPENGBIO反应液（Reagent C）避免光照；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
DOUNCE匀浆器：用于组织匀化
微型台式离心机：用于样品沉淀
培养箱：用于反应物孵育
黑色96孔板：用于样品荧光测定的容器
荧光酶标仪：用于样品荧光分析
实验步骤
- 样品准备
- 准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量
- （选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管
- （选择步骤）加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）清洗1次
- 即刻用刀片切碎组织
- 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
- 加入预冷的xx毫升HEPENGBIO裂解液（Reagent B）
- 涡旋震荡5秒，充分混匀
- 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约80下）
- 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管，放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）
- 小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管
- （选择步骤）如果上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）
- 即刻移入到1.5毫升离心管
- 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用HEPENGBIO Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HEPENGBIO30030.1）
- 放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用
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- 测定准备
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- 准备好上述制备的待测样品，置于冰槽里备用
- 设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长485nm，散发波长520nm
三、荧光测定
- 准备1个黑色96孔板，标记为：样品孔、空白对照孔、大对照空
- 移取100微升（20微克蛋白）上述制备的样品到样品孔里
- 移取xx微升HEPENGBIO饱和液（Reagent D）到大对照空里
- 移取xx微升HEPENGBIO阴性液（Reagent E）到空白对照空
- 分别加入xx微升HEPENGBIO反应液（Reagent C）到所有孔里
- 轻轻摇动黑色96孔板，混匀
- 室温下（22℃），孵育30分钟，避免光照
- 即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relative fluorescence unit；RFU）
- 计算样品钙离子浓度（注意：不要遗忘乘上稀释倍数）
【（样品RFU－空白对照孔RFU）÷（大对照空RFU－样品RFU）】X 345 （纳摩尔；解离常数）
注意事项
- 本产品为20次操作
- 操作时，须戴手套
- 避免使用EDTA等处理样品
- 孵育反应完成后即刻进行荧光测定
- 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度
- 检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围
- 样品浓度可以按照蛋白量或组织量定义
- 本公司提供系列钙生化检测试剂产品
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