- ￥5500
- 赫澎生物
- 上海
- HPBIO-JM10629
- 2025年11月26日
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干燥密封保存
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3个月
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1
- 供应商：
赫澎（上海）生物
- 规格：
20T
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脂肪酸β氧化过程（β-oxidation）在动物组织的线粒体发生的脂肪酸代谢通路，可概括为活化、转移、β氧化及后经三羧酸循环被彻底氧化CO2和H2O，并释放能量等四个阶段，是体内，尤其是组织器官，例如肝脏、心脏和骨骼肌等能量内平衡的关键代谢通路。食物中甘油三酯提供体内三分之一的能量供给，骨骼肌和心脏消耗80%的总能量。脂肪酸代谢异常，将导致脂质聚集在非脂肪组织内，产生慢性病的病理基础，例如糖尿病、心衰、肥胖症等。其中β氧化，包括脱氢、水合、二次脱氢和硫解，是将活化的各种长度脂酰辅酶酯（acyl CoA esters）不断缩短为乙酰辅酶A（acetyl CoA）单位，后经过三羧酸循环和呼吸链氧化成CO2和水。脂酰基辅酶A脱氢酶（acyl CoA dehydrogenase；AD；EC.1.3.99.3）是脂肪酸代谢进入β-氧化后工作的重要酶之一。通过底物棕榈酰肉碱（palmitoyl carnitine）的氧化产生的电子，由铁化物（ferricyanide）捕获而还原，其还原速率的检测，来评价β氧化的速率，即吸光值（420nm波长）的下降与时间的对应关系。
产品内容
HEPENGBIO缓冲液（Reagent A） 20毫升
HEPENGBIO反应液（Reagent B） 2毫升
HEPENGBIO底物液A（Reagent C） 1毫升
HEPENGBIO底物液B（Reagent D） 1毫升
HEPENGBIO阴性液（Reagent E） 1毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO反应液（Reagent B）、HEPENGBIO底物液A（Reagent C）和HEPENGBIO底物液B（Reagent D）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO底物液A（Reagent C）和HEPENGBIO底物液B（Reagent D）避免光照；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于反应操作的容器
比色皿：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
实验步骤
- 测定准备
- 准备好待测样品（例如纯化线粒体），至于冰槽里备用
- 开启并设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长420nm和470nm，间隔1分钟，读数6次（共5分钟），并置零
- 从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；HEPENGBIO底物液A（Reagent C）和HEPENGBIO底物液B（Reagent D）避免光照
- HEPENGBIO缓冲液（Reagent A）室温下均衡温度
- 背景对照测定
-
- 移取750微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
- 加入100微升HEPENGBIO反应液（Reagent B）
- 加入50微升HEPENGBIO底物液A（Reagent C）
- 加入50微升HEPENGBIO底物液B（Reagent D）
- 上下倾倒数次，混匀
- 在25℃温度下孵育3分钟
- 加入50微升HEPENGBIO阴性液（Reagent E）
- 上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）
- 即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照【（OD420—OD470）0分钟－（OD420—OD470）5分钟】
- 样品测定
-
- 移取750微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
- 加入100微升HEPENGBIO反应液（Reagent B）
- 加入50微升HEPENGBIO底物液A（Reagent C）
- 加入50微升HEPENGBIO底物液B（Reagent D）
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶反应速率
的技术支持，人家说六孔板细胞量不够，不知道您六孔板细胞量够吗？还有您后来做出来的结果咋样?有啥改进的地方没？好愁呀，希望得到您的帮助。急着毕业呀！ bin1986 我用的是悬浮细胞，接板密度大于10e6个，用的量完全够。如果这样子的话可能是你的化合物并没有激活casp-3吧 darcy913 你好，你以前应该用过caspase-3比色法检测试剂盒吧，虽然是很久以前的事了，用的是哪家公司的？效果怎么样？我用的是碧云天的，完全没
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