冰冻切片神经纤维比耳朔夫斯基（Bielschowsky）银染

神经纤维对于银离子敏感。通过嗜银染色，神经纤维还原离子银为可见金属银沉积，呈现黑色。
产品内容
HEPENGBIO去石蜡液（Reagent A） 毫升 (自备)
HEPENGBIO补水液A（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO补水液B（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO补水液C（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO补水液D（Reagent E） 毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent F） 毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent G） 毫升
HEPENGBIO中和液（Reagent H） 毫升
HEPENGBIO显色液A（Reagent I） 毫升
HEPENGBIO显色液B（Reagent J） 毫升
HEPENGBIO终止液（Reagent K） 毫升
HEPENGBIO平衡液（Reagent L） 毫升
产品说明书 1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

小型玻璃染色缸：用于石蜡切片的去石蜡和染色操作
中性树脂：用于切片封片
光学显微镜：用于切片染色后观察分析


实验步骤

• 去石蜡处理

1. 取出10片待测的10微米厚的石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）
2. 按下表依次放进小染色缸里孵育

染色缸	孵育时间
xx毫升HEPENGBIO去石蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO去石蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO去石蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液A（Reagent B）	3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液B（Reagent C）	3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液C（Reagent D）	3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液D（Reagent E）	3分钟

1. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液D（Reagent E）

二、 样本染色处理

1. 小心加上xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent G），铺满整个切片样品表面
2. 室温下至少孵育15分钟（注意：可见切片呈现浅棕色）
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO染色液（Reagent G）
4. 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO补水液D（Reagent E）中孵育2分钟
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液D（Reagent E）
6. 移取xx毫升HEPENGBIO染色液（Reagent G）到5毫升玻璃管里
7. 一滴一滴（25微升一次）加入HEPENGBIO中和液（Reagent H），直至溶液澄清，标记为HEPENGBIO染色强化液
8. 小心加上xx微升上述HEPENGBIO染色强化液，铺满整个切片样品表面
9. 室温下至少孵育30分钟，直至切片呈现深棕色
10. 小心移去切片上的HEPENGBIO染色强化液

三、 样本显色处理

1. 准备1个1.5毫升离心管
2. 加入xx微升HEPENGBIO显色液A（Reagent I）和xx微升HEPENGBIO显色液B（Reagent J），混匀，标记为HEPENGBIO显色工作液
3. 小心加上xx微升HEPENGBIO显色工作液在切片上，铺满整个切片样品表面
4. 室温下孵育10分钟，直至出现黑色（注意：显微镜下观察后继续下列操作）
5. 即刻移去切片上的HEPENGBIO显色工作液
6. 即刻加上xx微升HEPENGBIO终止液（Reagent K）在切片上，铺满整个切片样品表面
7. 室温下孵育1分钟