银染试剂盒

一、实验原理

银染是检测聚丙xi酰胺凝胶中的蛋⽩质，是银离⼦在碱性pH环境下被还原成⾦属银，沉淀在蛋⽩质的表⾯上显色的原理。

 

二、操作步骤（需⾃备⼄醇、⼄酸及去离⼦水。）

1）取适量样本，开展SDS-PAGE凝胶电泳。

2）固定：将电泳后的凝胶从玻璃板上剥离下来，清水冲洗⼲净，放⼊⼲净的直径12cm玻璃皿中，加⼊去离⼦水没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃5min，弃掉去离⼦水，加⼊固定液没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃30min。

固定液配制：依次加⼊17.5mL⼄醇、3.5mL⼄酸和14mL 去离⼦水，混匀后即成35mL固定液。

3）致敏：弃掉固定液，加⼊去离⼦水没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃5min，重复水洗⼀次，共2次，加⼊致敏液没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃30min。

致敏液配制：31.5mL去离⼦水中加⼊3.5mL致敏液I 、70μL致敏液II 、100μL致敏液III，混匀后使⽤，现⽤现配。

4）染色：弃掉致敏液，加⼊去离⼦水没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃2min，重复水洗⼀次，共2次，加⼊染色液没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃20min。

染色液：35mL纯水⼊加0.35mL银溶液，30μL显色液Ⅱ混匀，现⽤现配。

5）显色：弃掉染色液，加⼊去离⼦水没过胶，盖上盖⼦，在脱色摇床上室温摇晃1min，重复水洗⼀次，共2次，加⼊显色液没过胶，在脱色摇床上室温摇晃2min左右，溶液变浑浊，弃掉液体，加⼊新的显色液继续显色至⽬的条带清晰，拍照。

显色液：31.5mL去离⼦水中加⼊3.5mL显色液 I，15μL显色液Ⅱ混匀，现⽤现配。

 

三、技术指标

组分	规格（20T）	保存温度
致敏液I	72mL	4℃
致敏液II	1.6mL	4℃避光
致敏液III	2.2mL	4℃避光
显色液I	72mL	常温
显色液II	1.0mL	4℃避光
银溶液	7.6mL	4℃避光

 

四、注意事项

1）由于银染⾮常灵敏，操作时请注意尽量使⽤⾼纯度的水，并确保所使⽤的器 皿⾮常清洁，最好使⽤洁净的玻璃器 皿。操作时必须戴⼿套，避免⽪肤和凝胶直接接触。

2）银溶液有腐蚀性，操作时请⼩⼼，并确保有效防护以避免直接接触⼈体，并须注意避免腐蚀其它物品，对水⽣⽣物有毒或有害，禁⽌直接排⼊环境。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴⼀次性⼿套操作。