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赫澎(上海)生物
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文献和实验【求助】P53的翻译后修饰都有哪些? 怎样验证其修饰后与靶标启动子的结合活性的变化?
蛋白质功能的一个主要机制,p53在多个位点上可被磷酸化、顺-反异构化、乙酰化、泛素化、甲基化、糖基化等修饰,从而显示其生物学重要性。这种显示细胞或组织特异性并依赖细胞周期位置的多重修饰,是一种复杂的调节方式,随着细胞对DNA损伤、增殖、老化等产生的细胞信号的反应而发生波动。 磷酸化修饰 P53的磷酸化在多数情况下与蛋白质的稳定性有关。p53 N-末端的三个位点Ser15、Thr18、Ser20磷酸化后,使p53和其主要的负性调节因子MDM2之间的相互作用消失,而和乙酰转移酶
于基因转录。 迄今为止,已鉴定的人HAT可分为以下五大类 (1)Gcn5相关N―乙酰基转移酶(GNAT)超家族:GNAT超家族成员在几个同源区域和乙酰化相关基序存在相似性。决定该超家族的4个序列基序C、D、A、B的功能尚未完全阐明。基序C仅存在于GNAT家族的大多数HAT中,而基序A则高度保守,也存在于其他HAT家族,如MYST家族。另外,该家族还包含一个Arg/Gin―X―X―Gly―X―Gly/Ala片段,主要功能为特异性乙酰CoA底物的识别和结合。 (2)P300/CBP
巴豆酰化(Lysine Crotonylation, Kcr)存在于多种生物体的核心组蛋白和部分非组蛋白中,与其他类型的翻译后修饰(PTM) 类似,蛋白巴豆酰化(Lysine Crotonylation, Kcr)是一种可逆修饰,有促进基因表达、调控等重要功能。在蛋白质巴豆酰化中,最为常见的是赖氨酸巴豆酰化,由组蛋白乙酰转移酶 (HAT)、P300/CBP、PCAF 和 MOF 负责大多数巴豆酰化反应,而组蛋白去乙酰化酶HDAC1/2/3和SIRT1/2/3 逆转这些反应
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