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赫澎(上海)生物
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文献和实验的比值。△Rn:△Rn是Rn扣除基线后得到的标准化结果(△Rn=Rn-基线)。2.影响Ct值的关键因素模板浓度模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。反应液成分的影响任何分子的荧光发射都受环境因素影响----比如溶液的pH值和盐浓度。PCR反应的效率PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线。PCR效率取决于实验、反应混合液性能和样品质量。一般说来,反应效率在90
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
确。 Rn(Normalized reporter)是荧光报告基团的荧光发射强度与参比染料的荧光发射强度的比值。 △Rn:△Rn 是 Rn 扣除基线后得到的标准化结果(△Rn = Rn - 基线)。 2. 影响 Ct 值的关键因素 模板浓度 模板浓度是决定 Ct 的最主要因素。控制在一个合适范围内,使 Ct 在 15-35 之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响----比如溶液的 pH 值和盐浓度。 PCR 反应的效率 PCR 反应
胞现象。近年来,数字CCD成像荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜、多光子扫描显微镜、流式细胞仪等技术的发展,使我们不但能够精确地测定出钙离子浓度的变化,还可以得出准确的亚细胞水平空间定位。一、荧光钙离子测定常用技术1、荧光显微镜测定法是一类以荧光显微镜检测为基础的测量技术,可用来分析单独的完整活细胞中钙离子的分布和功能分子动力学。然而,钙离子指示剂的性质易受细胞内环境(如pH)的影响,而且在多种细胞内现象中可见许多分子的浓度、分布、功能会同时或相应地发生一系列变化,为了研究这些细胞内现象的机制并排
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