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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干燥密封保存
- 供应商:
赫澎(上海)生物
- 规格:
10次
产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO分解液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO稳定液(Reagent D) 微升
HEPENGBIO标准液(Reagent E) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO稳定液(Reagent D)和HEPENGBIO标准液(Reagent E)在4℃冰箱里,其余的保存在室温下;其中HEPENGBIO反应液(Reagent C)和HEPENGBIO稳定液(Reagent D),具有腐蚀性,注意操作安全,且避免光照,
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
恒温水槽:用于反应物孵育
比色皿:用于比色分析的容器
分光光度仪:用于样品比色测定
实验步骤
- 测定准备
- 准备好待测样品,置于冰槽里
- 设定好分光光度仪:波长600nm,并置零
- 准备好9个1.5毫升离心管,标记为1至9号管
- 按照下表配制标准液
- 放进冰槽里备用,避免光照
| 管号 | HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) | HEPENGBIO标准液(Reagent E) | 标准DNA浓度 |
| 1 | 0 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 2 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 3 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 4 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 5 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 6 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 7 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 8 | xx微升 | xx微升 | xx微克/10微升 |
| 9 | xx微升 | 0 | 0 |
二、比色测定
实验开始前,小心移取xx毫升HEPENGBIO反应液(Reagent C)和xx微升HEPENGBIO稳定液(Reagent D)到15毫升锥形离心管,混匀后,标记为HEPENGBIO反应工作液,避免光照。然后进行下列操作。
- 准备至少10个新的1.5毫升离心管作为测定管:标记9个标准管和1个待测样品管
- 分别加入xx微升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A)到每一个标准管和样品管
- 分别加入xx微升上述配制的HEPENGBIO标准液(Reagent E)到相应测定管里(注意:浓度和管号对号入座)
- 加入10微升待测样品到样品管里
- 分别加入xx微升HEPENGBIO分解液(Reagent B)到所有测定管里
- 放进70℃干式恒温槽或恒温水槽孵育20分钟
- 在室温下静置,直至试管温度降温到室温(15至30分钟)
- 分别加入xx微升含有HEPENGBIO反应液(Reagent C)和HEPENGBIO稳定液(Reagent D)的<
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文献和实验。在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶 作用后成为有色的产物,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二胺(O- phenylenediamine,OPD)、四甲基联苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS [2,2'-azino-di-(3-ethylbenziazobine sulfonate-6)]。 OPD氧化后的产物呈橙红色,用酸终止酶反应后,在492nm处有最高吸收峰,灵敏度 高,比色方便,是HRP结合物最常用的底物。OPD
性较差。小试管作为固相载体也有较大的吸附表面,而且标本的反应量也相应增加。板式及珠式ELISA的标本量一般为00-200ul,而小试管可根据需要加大反应体积,标本反应量的增加有助于试验敏感性的提高。小试管还可以当作比色杯,最后直接放入分光光度计中比色。也有应用聚苯乙烯胶乳或其他材料制成的微粒作为ELISA固相载体的。其优点是表面积极大,反应在悬液中进行,其速率与液相反应近似。以含铁的磁性微粒作为ELISA固相载体,反应后用磁铁的吸引进行分离,洗涤方便,试剂盒一般均配以特殊仪器。(二)包被的方式将抗原
也相应增加。板式及珠式ELISA的标本量一般为100-200ul,而小试管可根据需要加大反应体积,标本反应量的增加有助于试验敏感性的提高。小试管还可以当作比色杯,最后直接放入分光光度计中比色。 也有应用聚苯乙烯胶乳或其他材料制成的微粒作为ELISA固相载体的。其优点是表面积极大,反应在悬液中进行,其速率与液相反应近似。以含铁的磁性微粒作为ELISA固相载体,反应后用磁铁的吸引进行分离,洗涤方便,试剂盒一般均配以特殊仪器。3.1.2 包被的方式 将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating
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