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- 2025年11月02日
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赫澎（上海）生物
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文献和实验琥珀酸脱氢酶硝基蓝四唑盐法 在生物代谢过程中，由氢的供体(donor)把氢原子转移到氢的受体(receptor)的酶促反应称脱氢酶反应，该反应由脱氢酶(dehydrogenases)催化。脱氢酶种类很多，其活性均可通过四唑盐显示。四唑盐作为脱氢酶反应中的受氢体，接受脱氢酶作用于底物所释放的氢而形成有色的甲腊(formazane)，沉积于酶所在部位。 琥珀酸脱氢酶(succlnate dehydrogenase，SDH)是线粒体呼吸链的第一个酶，存在于所有有氧呼吸的细胞
或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。 大部分ELISA 检测以血清标本为主。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以 HRP 为标记的 ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性 HRP，也会
细胞存活和增殖的方法，所用的显色剂是一种能接受氢原子的化合物MTT，原理是，活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能将淡黄色的MTT还原为蓝紫色的结晶formazan，后者的产量与活细胞数成正相关。formazan可用DMSO、无水乙醇或酸化异丙醇等溶解，在酶标仪上以波长560nm进行比色。所检测的OD值的大小可反应细胞代谢活性的强弱。优点：灵敏度高，操作简便，自动化。缺点：影响因素多，重复性较差。注意：MTT有毒性致突变性，操作时应注意防护。丁香园网友Midas的观点为： 以下的protocol供参考
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